减少蛋白纯化中污染物的方法技术

技术编号:46362277 阅读:6 留言:0更新日期:2025-09-15 12:40
本文提供了从包含含有Fc的蛋白和一种或多种宿主细胞蛋白(HCP)的混合物中纯化包含Fc的蛋白的改善方法。该方法通常涉及将混合物施加到包含蛋白A色谱基质的色谱柱上,并且用辛酸钠洗涤缓冲液洗涤色谱基质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍


技术实现思路

【技术保护点】

1.从包含度拉糖肽和一种或多种宿主细胞蛋白(HCP)的混合物中纯化度拉糖肽的方法,该方法包括下列步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含150-350 mM辛酸钠。

3.根据权利要求1所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含200-350 mM辛酸钠。

4.根据权利要求1所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含约300 mM辛酸钠。

5.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含约50 mM Tris。

6.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含0.5-1.5 MNaCl。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.从包含度拉糖肽和一种或多种宿主细胞蛋白(hcp)的混合物中纯化度拉糖肽的方法,该方法包括下列步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含150-350 mm辛酸钠。

3.根据权利要求1所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含200-350 mm辛酸钠。

4.根据权利要求1所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含约300 mm辛酸钠。

5.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含约50 mm tris。

6.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含0.5-1.5 mnacl。

7.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液包含约1 m nacl。

8.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液具有ph 7-9。

9.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中辛酸钠洗涤缓冲液具有ph约8。

10.根据上述权利要求任一项所述的方法,其还包括用包含0.5-1.5 m nacl的nacl洗涤缓冲液洗涤色谱基质。

11.根据权利要求10所述的方法,其中nacl洗涤缓冲液包含约1 m nacl。

12.根据权利要求10或11所述的方法,其中nacl洗涤缓冲液包含约50 mm tris。

13.根据权利要求10-12任一项所述的方法,其中nacl洗涤缓冲液具有ph 7-9。

14.根据权利要求10-13任一项所述的方法,其中nacl洗涤缓冲液具有ph约8。

15.根据权利要求10-14任一项所述的方法,其中在用辛酸钠洗涤缓冲液洗涤之前用nacl洗涤缓冲液洗涤色谱柱。

16.根据权利要求10-14任一项所述的方法,其中在用nacl洗涤缓冲液洗涤之前用辛酸钠洗涤缓冲液洗涤色谱柱。

17.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中在步骤(a)与步骤(b)之间用ph 7-9的tris缓冲液平衡色谱基质。

18.根据权利要求17所述的方法,其中tris缓冲液包含10-100 mm tris。

19.根据权利要求17或18所述的方法,其中tris缓冲液包含约50 mm tris。

20.根据权利要求17-19任一项所述的方法,其中tris缓冲液具有ph约8.0。

21.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中用2-10个柱体积的辛酸钠洗涤缓冲液洗涤色谱基质。

22.根据权利要求21所述的方法,其中用约2个柱体积的辛酸钠洗涤缓冲液洗涤色谱基质。

23.根据权利要求10-22任一项所述的方法,其中用2-10个柱体积的nacl洗涤缓冲液洗涤色谱基质。

24.根据权利要求23所述的方法,其中用约2或约5个柱体积的nacl洗涤缓冲液洗涤色谱基质。

25.根据权利要求1所述的方法,其中用下列物质依次洗涤色谱基质:

26.根据权利要求10-25任一项所述的方法,其中用nacl洗涤缓冲液以300±30 cm/hr的流速洗涤色谱基质。

27.根据上述权利要求任一项所述的方法,其中用辛酸钠洗涤缓冲液以300±30 cm/hr的流速洗涤色谱基质。

28.根据上述权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:A·L·许布纳T·布兰克
申请(专利权)人:伊莱利利公司
类型:发明
国别省市:

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