一种可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法及其在外泌体提取中的应用技术

本发明专利技术公开了一种可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法及其在外泌体提取中的应用，向羧基化磁性氧化石墨烯中加入EDC，进行反应后加入NHS，进行反应后，得到混合液；将氨基化聚乙二醇的水溶液加入到混合液中，进行酰胺化反应，用纯水磁吸洗涤并干燥即可。采用本发明专利技术中方法提取外泌体，能够获取30‑150nm的外泌体；且本发明专利技术中使用聚乙二醇修饰磁珠的成本低、制备快速、磁性较强的优点，能够在30s内完全与溶液分离。并且通过沉淀法捕获外泌体，释放后不损伤其活性并提升外泌体的得率和纯度，回收的磁珠可以重复使用，降低了成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于纳米生物材料与，具体涉及一种可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法及其在外泌体提取中的应用。

技术介绍

1、外泌体(exosomes)是由细胞内多泡体(mvbs)与细胞膜融合后释放的纳米级囊泡(直径30-150nm)，具有典型的磷脂双分子层结构。其表面富含四跨膜蛋白(cd9/cd63/cd81)、热休克蛋白(hsp70/hsp90)及整合素等标志物，内部携带功能性蛋白质、mrna、mirna和dna片段。根据国际细胞外囊泡学会(isev)指南(misev2018)，外泌体需通过透射电镜(tem)观察形态、纳米颗粒追踪分析(nta)测定粒径、以及western blot检测标志蛋白三重验证。外泌体作为细胞间通讯的关键媒介，参与以下生理病理过程：(1)疾病诊断：肿瘤源性外泌体携带pd-l1、egfrviii等生物标志物，在液体活检中具有重要价值；(2)药物递送：外泌体的天然靶向性使其成为sirna/mrna递送的理想载体；(3)组织修复：间充质干细胞(msc)外泌体通过传递mir-21、vegf等促进血管再生。所以，细胞外泌体的分离纯化是一道难题本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，氨基化聚乙二醇的分子量为200-100000Da。

3.根据权利要求1所述的可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，氨基化聚乙二醇为线型氨基化聚乙二醇、四臂氨基化聚乙二醇和八臂氨基化聚乙二醇。

4.根据权利要求1所述的可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，羧基化磁性氧化石墨烯和EDC的物质的量比为1∶5-20；羧基化磁性氧化石墨烯和NHS的物质的量比为1∶5-20；氨基化聚乙二...

【技术特征摘要】

1.一种可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，氨基化聚乙二醇的分子量为200-100000da。

3.根据权利要求1所述的可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，氨基化聚乙二醇为线型氨基化聚乙二醇、四臂氨基化聚乙二醇和八臂氨基化聚乙二醇。

4.根据权利要求1所述的可重复利用的聚乙二醇修饰磁珠的制备方法，其特征在于，羧基化磁性氧化石墨烯和edc的物质的量比为1∶5-20；羧基化磁性氧化石墨烯和nhs的物质的量比为1∶5-20；氨基化聚乙二醇和羧基化磁性氧化石墨烯的物质的量比为20∶1-10。

5.根据权利要求1所述的可重复利用的聚...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔宁，黄菊，
申请(专利权)人：苏州宁饶生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：