一种内酯水解酶及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体涉及一种内酯水解酶及其应用。所述内酯水解酶是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；所述内酯水解酶的编码基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术中所构建的内酯水解酶具有较高的催化性能，在以内酯水解酶为生物催化剂、ZEN为底物以及MES缓冲液构成的反应体系中，反应2h可降解30％初始浓度为10μg/mL的玉米赤霉烯酮。本发明专利技术安全环保，表达纯化的内酯水解酶能够有效用于控制玉米赤霉烯酮污染，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及一种内酯水解酶及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用。

技术介绍

1、玉米赤霉烯酮(zearalenone，zen)属于二羟基苯甲酸内酯类化合物，分子式为c18h22o5，分子量为318。外观是白色结晶，熔点为161℃-165℃，易溶于乙醚、三氯甲烷等有机溶剂，但几乎不溶于水。对热稳定，且在碱性条件下内酯键可打开，碱浓度降低时又可恢复。由fusarium graminearum、f.culmorum等多种镰刀菌属产生的雌激素类真菌毒素，广泛存在于玉米、小麦、大麦、燕麦、高粱等谷物中。其污染在全球范围内普遍存在，因气候条件对zen的产生有显著影响，温暖湿润的环境(如温度在20℃以上且空气湿度超过20％)会促进其生成，在温带和温暖地区污染尤其严重。相关毒理学试验显示，玉米赤霉烯酮能够影响生育，具有致癌和免疫等毒理作用，同时也是一种神经毒素。此外，玉米赤霉烯酮还具有致畸性，并且具有细胞毒性以及会引发炎症反应。

2、玉米赤霉烯酮的分布广泛，主要存在于各类谷物及其制品中，严重影响人们和牲畜的健康，同时污染环境并造成经济损失。因此，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种内酯水解酶，其特征在于，所述内酯水解酶是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质或与SEQ ID NO.1具有90％以上同源性的氨基酸序列组成的蛋白质。

2.如权利要求1所述内酯水解酶的编码基因，其特征在于，所述内酯水解酶的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，或与SEQ ID NO.2所示核苷酸序列具有90％以上同源性的苷酸序列。

3.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体携带有权利要求2所述内酯水解酶的编码基因。

4.如权利要求3所述重组表达载体，其特征在于，重组表达载体的获取步骤为：将内酯水解酶的编码基因，...

【技术特征摘要】

1.一种内酯水解酶，其特征在于，所述内酯水解酶是由seq id no.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质或与seq id no.1具有90％以上同源性的氨基酸序列组成的蛋白质。

2.如权利要求1所述内酯水解酶的编码基因，其特征在于，所述内酯水解酶的编码基因的核苷酸序列如seq id no.2所示，或与seq id no.2所示核苷酸序列具有90％以上同源性的苷酸序列。

3.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体携带有权利要求2所述内酯水解酶的编码基因。

4.如权利要求3所述重组表达载体，其特征在于，重组表达载体的获取步骤为：将内酯水解酶的编码基因，插入经过noti和xhol酶切后质粒pet-28a中，得到表达重组表达载体，记为pet-28a-sol3。

5.一种重组工程菌，其特征在于，所述重组工程菌是将权利要求4所述的重组载体导入大肠杆菌rosetta(de3)感受态细胞后，得到重组工程菌，记为pet-...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨其亚，张红印，吉崎好，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：