基于2型鹅星状病毒的杂交瘤细胞株、构建方法、单克隆抗体和检测试剂技术

本发明专利技术公开了一种基于2型鹅星状病毒杂交瘤细胞株、构建方法、单克隆抗体和检测试剂。所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株A10D12，其保藏号为CCTCC NO:C202506，于2025年3月26日保藏于中国典型培养物保藏中心；或者，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株A12G1，其保藏号为CCTCCNO:C202507，于2025年3月26日保藏于中国典型培养物保藏中心。本发明专利技术利用纯化的大肠杆菌表达的重组2型鹅星状病毒衣壳蛋白免疫小鼠，获得了两株特异性针对GAstV‑2ORF2蛋白的单克隆抗体，并鉴定了这些单克隆抗体识别的B细胞表位。基于这些单抗，建立了用于2型鹅星状病毒的高效检测免疫学检测方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程领域，具体地，涉及基于2型鹅星状病毒杂交瘤细胞株、构建方法、单克隆抗体和检测试剂。

技术介绍

1、鹅星状病毒属于星状病毒科禽星状病毒属，是一种无包膜的单股正链rna病毒。鹅星状病毒基因组全长约为7.2nt，由5’非翻译区(utr)、三个开放阅读框(orf1a、orf1b和orf2)、3′utr组成。orf1a和orf1b编码参与病毒复制的非结构蛋白，而orf2编码病毒唯一的衣壳蛋白，含相对保守的n端衣壳核心区(s和p1结构域)和高度可变的c端刺突结构域(p2结构域)。衣壳蛋白与病毒颗粒的成熟和组装、病毒的细胞嗜性、病毒的致病性、抗体的产生等密切相关。基于orf2区域的核苷酸序列的差异，gastv可分为两个基因型：gastv-1和gastv-2，gastv-1和gastv-2的orf2核苷酸序列同源性仅为40.4％–41.6％。流行病学调查数据显示，鹅星状病毒在我国主要流行毒株为gastv-2。

2、2型鹅星状病毒又称为新型鹅星状病毒，主要感染5至15日龄的雏鹅，引起以关节腔和内脏表面尿酸盐沉积、肾脏肿大出血为典型特征的雏鹅本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于2型鹅星状病毒的杂交瘤细胞株的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤S200中的表达载体为原核表达载体pET-30a；和/或，

3.采用权利要求1或2所述的构建方法得到的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株A10D12，其保藏号为CCTCCNO:C202506，于2025年3月26日保藏于中国典型培养物保藏中心。

4.采用权利要求1或2所述的构建方法得到的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株A12G1，其保藏号为CCTCCNO:C202507，于2...

【技术特征摘要】

1.一种基于2型鹅星状病毒的杂交瘤细胞株的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤s200中的表达载体为原核表达载体pet-30a；和/或，

3.采用权利要求1或2所述的构建方法得到的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株a10d12，其保藏号为cctccno:c202506，于2025年3月26日保藏于中国典型培养物保藏中心。

4.采用权利要求1或2所述的构建方法得到的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株a12g1，其保藏号为cctccno:c202507，于2025年3月26日保藏于中国典型培养物保藏中心。

5.一种2型鹅星状病毒orf2蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述2型鹅星状病毒orf2蛋白单克隆抗体由权利要求3或4所述的杂交瘤细胞株制备得到。

6.根据权利要求5所述的2型鹅星状病毒orf2蛋白单克...

【专利技术属性】
技术研发人员：王安平，刘莉，吴植，成玉婷，贾文凤，卢会鹏，周庆康，张小璐，谢军，
申请(专利权)人：江苏农牧科技职业学院，
类型：发明
国别省市：