一种牛卵母细胞体外培养的培养液及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种牛卵母细胞体外培养的培养液及其应用，属于家畜胚胎工程技术领域。针对现有技术中牛卵母细胞体外培养的培养液中缺少免疫系统，导致卵母细胞体外培养与体内正常发育有较大差距的问题，本发明专利技术在牛卵母细胞体外培养的培养液中加入巨噬细胞分泌的促炎因子IL‑1α和抑炎因子IL‑10，进而完善牛卵母细胞体外培养过程中的免疫需求，能够有效提高牛卵母细胞体外培养的发育质量，提升卵母细胞受精后的胚胎发育效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及家畜胚胎工程，尤其涉及一种牛卵母细胞体外培养的培养液及其应用。

技术介绍

1、以超数排卵为基础的辅助生殖技术已广泛用于奶牛的遗传改良，可显著提高优良母畜的产犊数，提高优良母畜繁殖效率。但体外培养的卵母细胞质量及后续胚胎发育的效率与体内正常发育的卵母细胞和胚胎相比仍有很大差距。如体外培养可以改变卵泡细胞及胚胎的dna甲基化、卵母细胞成熟受损、质量变差、增加卵母细胞染色体的非整倍体、扰乱基因组印迹、影响子宫内膜容受性、降低着床率、延迟胚胎发育等。这些问题严重影响体外胚胎生产的应用和效率，制约胚胎工程技术的广泛应用。

2、在生理条件下，排卵事件受淋巴细胞、巨噬细胞和粒细胞分泌的细胞因子介导的炎症反应所调节，并在雌性生殖道分泌的生长因子可促进植入前胚胎的发育，并可能作为植入后发育能力和妊娠结局的表观遗传决定因素。因此，与体内卵母细胞和胚胎生长环境相比，体外培养体系中缺少了免疫系统的参与，在体外培养体系中完善免疫系统是解决体外培养效率低下的关键。

技术实现思路

1、针对上述存在的问题，本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述培养液中包含促炎因子IL-1α和抑炎因子IL-10。

2.根据权利要求1所述的一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述促炎因子IL-1α和抑炎因子IL-10来源于巨噬细胞。

3.根据权利要求1所述的一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述培养液还包括基础培养基、E2、HMG、FBS、ITS-G、丙酮酸钠、EGF、bFGF、丝氨酸和甘氨酸。

4.根据权利要求3所述的一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述培养液中不同组分的添加浓度分别为：以基础培养基的体积为基准，E2的添加浓度为...

【技术特征摘要】

1.一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述培养液中包含促炎因子il-1α和抑炎因子il-10。

2.根据权利要求1所述的一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述促炎因子il-1α和抑炎因子il-10来源于巨噬细胞。

3.根据权利要求1所述的一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述培养液还包括基础培养基、e2、hmg、fbs、its-g、丙酮酸钠、egf、bfgf、丝氨酸和甘氨酸。

4.根据权利要求3所述的一种牛卵母细胞体外培养的培养液，其特征在于：所述培养液中不同组分的添加浓度分别为：以基础培养基的体积为基准，e2的添加浓度为0.5-1.5μg/ml，hmg的添加浓度为0.05-0.1 iu/ ml，fbs的体积分数为5-15%，its-g的体积分数为0.5-1.5%，丙酮酸钠的添加浓度为0.02-0.025mg/ml，egf的添加浓度为8-13 ng/ml，bfgf的添加浓度为10-15 ng/ml，丝氨酸的添加浓度为22-28μm，甘氨酸的添加浓度为5-7mm，il...

【专利技术属性】
技术研发人员：王勇胜，魏耀昶，胡秀涟，邓婷婷，吴艳芳，宋雪潇，王敬雅，范德湘，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：