一种翡翠贻贝足部囊泡的提取方法技术

本发明专利技术提供了一种翡翠贻贝足部囊泡的提取方法，包括如下步骤：S1.对足部近端区域和远端区域组织分别取样进行研磨，获取足部组织匀浆液；S2.采用多级过滤的方式去除组织碎片和其他杂质，获得足部囊泡粗提液；S3.采用多次离心的方式进一步去除细胞器和其他杂质，获得纯化的足部近端区域囊泡和远端区域囊泡。本发明专利技术采用多次过滤、低速离心和滤膜过滤等方式进行囊泡的粗提取，在较少离心次数、转速和时间的条件下即可获得囊泡，不仅简化了囊泡提取过程，而且最大限度的保持囊泡中生物大分子的活性，可用于足丝形成机制研究和足丝仿生材料研发等科研领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及海洋生物，特别涉及一种翡翠贻贝足部囊泡的提取方法。

技术介绍

1、足丝在双壳贝类的附着、聚集和繁殖等行为中发挥重要作用(mccartney,2021)，但是其自组装机制尚未阐释清楚，这主要是由于足丝自组装发生在足腹沟密闭空间，无法直接进行观察，目前只能采用体外合成足丝蛋白的方法进行直接观察，足丝蛋白存在种类多、保守性低、功能多样化等特征(qin et al.,2016；li et al.,2017；liu,2022)，因此足丝蛋白的注释和预测进展较慢。

2、直接通过足丝进行蛋白质组测序，无法获得全部的足丝蛋白，而采用足部组织或足腺进行组学测序(demartini et al.,2017)，又存在其他组织干扰的问题，无法获得准确的参与足丝自组装蛋白的种类。足丝蛋白以液相存储在足部腺体——足腺中，在遇到合适的附着基后，双壳贝类会将囊泡运输至足腹沟处，囊泡破裂释放出其中的足丝蛋白，在ph等其他条件的诱导下，足丝蛋白中数分钟内迅速完成自组装，形成固态、具有鲜明层级结构特征的足丝(yu et al.,2011；priemel et al.,本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种翡翠贻贝足部囊泡的提取方法，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤S1中，对足部近端区域和远端区域组织分别取样，包括：去除翡翠贻贝足部表皮和部分肌肉组织，将足部组织分为近端和远端两个区域，用双蒸水冲洗后，分别保存在不同的离心管中备用。

3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，按照足部分泌足丝线和黏附盘的足腺位置，将足部组织分为近端和远端两个区域。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤S1中，用于对足部组织进行研磨的研磨液内含有0.2M pH5.5柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液、0.4M蔗糖、0.15M E...

【技术特征摘要】

1.一种翡翠贻贝足部囊泡的提取方法，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤s1中，对足部近端区域和远端区域组织分别取样，包括：去除翡翠贻贝足部表皮和部分肌肉组织，将足部组织分为近端和远端两个区域，用双蒸水冲洗后，分别保存在不同的离心管中备用。

3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，按照足部分泌足丝线和黏附盘的足腺位置，将足部组织分为近端和远端两个区域。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤s1中，用于对足部组织进行研磨的研磨液内含有0.2m ph5.5柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液、0.4m蔗糖、0.15m edta和0.005m抗坏血酸。

5.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤s1中，进行研磨的方法包括：将分别存放足部近端区域和远端区域组织的离心管放入液氮中进行预冷，然后转移至研磨管中低温研磨5min。

6.根据权利要求5所述的提取方法，其特征在于，研磨管中，每管近端区域的足部组织来自6-8只翡翠贻贝，每管远端区域的足部组织来自3-4只...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾潇，战欣，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：