用于高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器及构建方法与应用技术

本发明专利技术涉及用于高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器的构建方法与应用：将T7启动子，镉离子特异性结合蛋白CadR特异性结合位点cadO和lac操纵基因lacO设计组成双输入启动子，并将LacI蛋白作为调控模块，构建了高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器。构建的传感器在诱导培养6小时时的检测限为0.00001nM，实现了超痕量检测；线性响应范围为0.00001‑0.02nM；传感器的灵敏度为4722.76；同时传感器具有良好的特异性以及在混合金属离子体系中能够较好地分辨镉离子，具有优异的抗干扰性，为痕量检测领域及微量样本场景快速、高效检测镉离子提供了新方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器及基于该传感器的镉离子检测方法；涉及一种由t7启动子，镉离子特异性结合蛋白cadr特异性结合位点cado和lac操纵基因laco组成的双输入启动子，基于该启动子并用laci蛋白作为调控模块构建全细胞生物传感器，对水样中的镉离子进行定性分析。基于该传感器的检测方法可以实现对超痕量镉离子的高灵敏检测，属于分子生物学及基因工程菌改造领域。

技术介绍

1、镉(cd)是一种具有广泛工业用途但有显著生物毒性的重金属，由于其难以被生物降解，环境中的重金属通过食物链的富集作用进入环境生物并最终进入人体中，对环境和人体健康造成严重危害。世界卫生组织国际癌症研究机构将镉及其化合物列为一类致癌清单中，长期接触过量镉会引起肾脏损害，造成骨骼病变等。目前常用物理、化学方法等传统方法检测镉离子，这些方法具有良好的灵敏度和选择性，但操作步骤复杂、耗时较长，难以满足简单、快速、实时监测的要求，因此需要开发更为高效、准确的方法对环境中的镉离子进行监测。

2、生物传感作为一门融合生物、物理、电子等多学科的新型检测技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器；其特征是，全细胞生物传感器的重组质粒核苷酸序列为SEQ ID NO.11。

2.权利要求1的用于高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器；其特征是，以质粒pET-28a(+)为载体，选取镉离子特异性结合蛋白的特异性启动子Pcad的-35区与-10区之间长度为19bp的间隔区以及-10区后的6bp作为镉离子结合蛋白CadR的结合位点cadO，由T7启动子结合两个cadO位点，并在两个cadO中间加入一个lac操纵基因(lacO)，按T7-cadO-lacO-cadO的顺序通过聚合酶链式反应(PCR)进行连接，组装...

【技术特征摘要】

1.一种用于高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器；其特征是，全细胞生物传感器的重组质粒核苷酸序列为seq id no.11。

2.权利要求1的用于高灵敏检测超痕量镉离子的双输入全细胞生物传感器；其特征是，以质粒pet-28a(+)为载体，选取镉离子特异性结合蛋白的特异性启动子pcad的-35区与-10区之间长度为19bp的间隔区以及-10区后的6bp作为镉离子结合蛋白cadr的结合位点cado，由t7启动子结合两个cado位点，并在两个cado中间加入一个lac操纵基因(laco)，按t7-cado-laco-cado的顺序通过聚合酶链式反应(pcr)进行连接，组装成新的特异性双输入启动子pt7-cado-l...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾晓强，秦雨珂，胡舒婷，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：