一种溶酶体可视化及富集提取的制剂及其方法技术

本发明专利技术公开了一种溶酶体可视化及富集提取的制剂及其方法。本发明专利技术首次通过设计TMEM192中部分跨膜区作为溶酶体特性靶向原件，避免过表达完整功能性蛋白导致的细胞蛋白质组扰动。其次，本发明专利技术还设计了基于纳米抗体的荧光蛋白和富集标签，实现对溶酶体的精准提取和细胞学成像。该技术可以用于对目标机体实现溶酶体提取及成像，可以结合其他组学技术实现对溶酶体的系统研究，具有重要的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物；具体涉及一种溶酶体可视化及富集提取的制剂及其方法。

技术介绍

1、溶酶体，作为细胞内负责生物材料回收与代谢信号传递的关键细胞器，与众多人类疾病紧密相连[1]。然而，由于其体积在细胞内占比极小，对溶酶体分子成分的精确鉴定一直是一项艰巨任务。尽管现有的溶酶体纯化技术为我们揭示了溶酶体生物学的诸多奥秘，但这些方法往往耗时费力，且易导致代谢产物及相邻蛋白质的丢失，限制了研究的深入。

2、先前的研究中，一种基于溶酶体蛋白tmem192的免疫分离方法——lysoip应运而生，它能迅速分离出完整的溶酶体，为后续的多组学测量提供了可能。然而，该方法也存在潜在风险：在细胞中过表达带有标签的tmem192蛋白可能会干扰细胞的正常功能。尽管tmem192的具体功能尚未完全明晰，但有研究指出它与hepg2细胞的自噬与凋亡过程息息相关[2,3]。这表明，外源完整蛋白的过表达可能会扰乱机体的蛋白质组平衡，进而影响研究结果的准确性。

3、[1]n.y.park,d.h.cho.the tbk1-scf-tmem192-tax1bp1 axis本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种溶酶体可视化及富集提取的方法，其特征在于包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的ΔTMEM192蛋白质的序列具体为SEQID No.1所示的蛋白质序列。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述的标记质粒包含表达如SEQ IDNo.2所示的蛋白质的序列；步骤(2)所述的识别质粒包含表达如SEQ ID No.5所示的蛋白质的序列。

4.如权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于：所述荧光蛋白序列为红色荧光蛋白mScarlet3。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的...

【技术特征摘要】

1.一种溶酶体可视化及富集提取的方法，其特征在于包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的δtmem192蛋白质的序列具体为seqid no.1所示的蛋白质序列。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述的标记质粒包含表达如seq idno.2所示的蛋白质的序列；步骤(2)所述的识别质粒包含表达如seq id no.5所示的蛋白质的序列。

4.如权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于：所述荧光蛋白序列为红色荧光蛋白mscarlet3。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的目标细胞为hek293细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪洋，张静，卢逸帆，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：