一种卵菌核心致病因子木聚糖特异的葡聚糖酶蛋白晶体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种卵菌核心致病因子木聚糖特异的葡聚糖酶蛋白晶体及其制备方法和应用。本发明专利技术通过基因工程的方法，在毕赤酵母中成功表达纯化了高纯度的PsXEG1蛋白，同时筛选出了该蛋白能够形成完美晶形的结晶条件，最后通过X射线晶体衍射收集晶体数据继而解析了该蛋白的晶体结构，并利用结构提供的信息通过虚拟筛选和分子动力学模拟等技术获得PsXEG1小分子抑制剂，抑制剂有效的抑制PsXEG1酶活性，并且对多种病原菌都有较好的防控效果。综上，本发明专利技术通过毕赤酵母细胞表达体系结合获得的PsXEG1结构信息，可进行抗菌剂设计，在防治植物卵菌病害领域具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种卵菌核心致病因子木聚糖特异的葡聚糖酶蛋白晶体的及其制备方法和应用。

技术介绍

1、卵菌(oomycete)隶属于藻菌界(stramenopiles)，包含大量植物和动物病原菌，给农业生产和生态环境带来巨大威胁。大豆疫霉(phytophthora sojae)是卵菌中重要的植物病原菌，主要侵染大豆根茎部引起大豆根茎腐烂病，每年给世界造成约20亿美元的经济损失，严重威胁着大豆生产。卵菌在进化上与真菌相差甚远，与藻类亲缘关系较近，这种差别导致卵菌与真菌在基因组结构、代谢途径、致病机理等存在较大差异，使得许多常规杀菌剂对防控植物病原卵菌都没有很好的效果，因此，开发高效的卵菌抗菌剂对设计植物疫病防控策略具有重要意义。质外体是植物细胞原生质体外围由细胞壁和胞间隙组成的系统，也是寄主抵御病原菌早期侵染的关键战场；病原菌能否突破植物质外体防御系统，是其能否成功侵染的关键。本实验室前期研究表明：1)xeg1是疫霉菌关键质外体致病因子，其属于糖基水解酶gh12家族，具有木聚糖特异的葡聚糖酶活性；2)大豆疫霉xeg1基因敲除突变体致病力几乎丧失，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种卵菌核心致病因子木聚糖特异的葡聚糖酶蛋白晶体，其特征在于，该晶体具有空间群I23，一个不对称单元中有一个分子，晶胞参数为所述的葡聚糖酶蛋白为如下(a1)或(a2)或(a3)所述的蛋白质：

2.根据权利要求1所述的蛋白晶体，其特征在于，该蛋白晶体的底物结合口袋呈电负性，由2个疏水的芳香族氨基酸以及2个亲水和亲电的谷氨酸形成了-1、-2、-3、-4四个底物结合位点。

3.根据权利要求2所述的蛋白晶体，其特征在于，所述的2个疏水的芳香族氨基酸以及2个亲水和亲电的谷氨酸为Trp26、Trp41、Glu136、Glu222。

4.根据权利要求1所述的蛋白...

【技术特征摘要】

1.一种卵菌核心致病因子木聚糖特异的葡聚糖酶蛋白晶体，其特征在于，该晶体具有空间群i23，一个不对称单元中有一个分子，晶胞参数为所述的葡聚糖酶蛋白为如下(a1)或(a2)或(a3)所述的蛋白质：

2.根据权利要求1所述的蛋白晶体，其特征在于，该蛋白晶体的底物结合口袋呈电负性，由2个疏水的芳香族氨基酸以及2个亲水和亲电的谷氨酸形成了-1、-2、-3、-4四个底物结合位点。

3.根据权利要求2所述的蛋白晶体，其特征在于，所述的2个疏水的芳香族氨基酸以及2个亲水和亲电的谷氨酸为trp26、trp41、glu136、glu222。

4.根据权利要求1所述的蛋白晶体，其特征在于，所述的卵菌为大豆疫霉，辣椒疫霉或致病疫霉。

5.根据权利要求1-3中任一所述的蛋白晶体，其特征在于，该蛋白晶体采用如下...

【专利技术属性】
技术研发人员：王源超，夏业强，刘霖，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：