一种高活性PET水解酶突变体及其工业级解聚应用制造技术

本发明专利技术涉及生物催化领域，公开了一种高活性PET水解酶突变体及其工业级解聚应用。本发明专利技术提供了一种PET水解酶突变体，为将SEQ ID NO.2第182位和第186位氨基酸残基突变，得到具有相同功能的蛋白；本发明专利技术经过计算设计和定点突变，成功获得兼具高热稳定性与催化效率的PET水解酶突变体Kubu‑PM12‑NM。经实验证明，改造后的突变体蛋白熔融温度达到92.9℃；在165g/L工业级PET底物体系中，其催化PET水解的最大反应速度相较模版酶提升1.29倍，是高效PET水解酶LCC‑ICCG的1.43倍；在低酶载量下高固载量PET的解聚率能达到90％以上，该突变体在严苛工业条件下展现出卓越应用性能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物催化领域，涉及一种高活性pet水解酶突变体及其工业级解聚应用。

技术介绍

1、塑料凭借优异的耐热性、机械性能及化学稳定性被广泛应用于工业、农业及医疗领域，但全球仅有9％的塑料被有效回收。聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)作为年产量超8200万吨(中国2023年产量达6500万吨)的合成聚酯，因其稳定的芳香族结构和结晶区特性，在自然环境中难以降解，且通过土壤渗透、海洋迁移等途径进入生态循环，造成持久性污染。传统物理回收法(填埋、焚烧、机械再生)存在填埋占用土地、焚烧高污染、机械再生产品质量下降等缺点；传统化学降解法(甲醇解、水解、氨基解、糖酵解)需在高温高压下使用危险催化剂，面临催化剂分离难、反应条件苛刻、成本较高等问题，导致其工业化应用受限。酶法解聚pet可在接近玻璃转化温度(tg＝75℃)的温和条件下运行，产物纯度高且无需有毒试剂，兼具环境友好性与资源循环优势，为塑料污染治理提供可持续解决方案。

2、近年生物酶法降解pet技术取得显著突破，2016年yoshida等人从大阪伊德氏杆菌(ideonella sakaiensis 2本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种PET水解酶突变体，为如下任一种：

2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，

3.根据权利要求1或2所述的突变体蛋白，其特征在于，

4.与权利要求1-3任一所述突变体蛋白相关的生物材料，为下述B1)至B4)中的任一种：

5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于：B1)所述核酸分子为如下b1)-b6)中任一种：

6.权利要求1-3任一所述突变体蛋白在如下任一中的应用；

7.权利要求4或5所述生物材料在如下任一中的应用：

8.一种产品，其包括权利要求1-3任一所述突变体蛋白或权利要求4或5所述...

【技术特征摘要】

1.一种pet水解酶突变体，为如下任一种：

2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，

3.根据权利要求1或2所述的突变体蛋白，其特征在于，

4.与权利要求1-3任一所述突变体蛋白相关的生物材料，为下述b1)至b4)中的任一种：

5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于：b1)所述核酸分子为如下b1)-...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱玉山，寸云涛，汪宏钊，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：