一种跨动物门类适用的矿化外壳来源的单细胞悬液制备方法技术

技术编号:45948901 阅读:10 留言:0更新日期:2025-07-29 17:51
本发明专利技术公开了一种跨动物门类适用的矿化外壳来源的单细胞悬液制备方法,属于细胞悬液制备技术领域。本发明专利技术针对矿化外壳结构较为坚硬的情况,对脱钙前处理、脱钙液、脱钙过程、消化方法等进行了优化,获得高质量单细胞悬液。本发明专利技术提供的单细胞悬液制备方法可适用于跨动物门类的矿化外壳来源的活细胞获得,其中矿化外壳包括外骨骼、壳体及棘刺,所述方法采用破碎处理及非酶解纯物理研磨消化,实验耗时更短,操作步骤简便,极大减少生物损伤,最大程度保留细胞的完整性和活性,能够充分满足各类单细胞测序平台文库构建的需要。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞悬液制备,具体涉及一种普适性强的矿化外壳来源(如外骨骼、壳体及棘刺)的单细胞悬液制备方法,尤其适用于从无脊椎动物不同动物门类(如软体动物、棘皮动物及节肢动物)的矿化外壳样本中制备单细胞悬液。


技术介绍

1、长期以来,无脊椎动物的矿化外壳(如软体动物壳体、节肢动物外骨骼等)在生物学领域被视为无生命的惰性矿化物——“无生命的石头”;与之相对,脊椎动物骨骼则被认为是活的“器官”,其内部骨髓含有活细胞。基于这种认知差异,现有单细胞悬液制备技术几乎全部聚焦于脊椎动物骨髓等软组织来源的细胞解离,而针对无脊椎动物矿化外壳的相关研究长期处于空白状态。本研究团队的前期研究首次颠覆了这一传统认知:通过活细胞示踪及转录组证据,证实了以贝类为代表的无脊椎动物矿化外壳中存在活细胞。这为无脊椎动物矿化外壳来源的单细胞研究奠定了生物学基础,基于此,我们首次实现了针对无脊椎动物矿化外壳来源的单细胞悬液制备的尝试。

2、然而,脊椎动物与无脊椎动物矿化外壳存在显著差异:脊椎动物骨骼以羟基磷灰石(磷酸钙) 为主要矿物相(占比60-70%),矿物晶体呈多孔纳米结构,本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种跨动物门类适用的矿化外壳来源的单细胞悬液制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述矿化外壳来源于无脊椎动物,所述矿化外壳包括外骨骼、壳体或棘刺。

3.根据权利要求2所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述无脊椎动物包括软体动物、棘皮动物或节肢动物。

4.根据权利要求2所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述无脊椎动物包括扇贝、海胆或蟹。

5.根据权利要求1所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述清洗液为磷酸盐缓冲液。

6.根据权利要求1所述的单细胞悬液制备方法...

【技术特征摘要】

1.一种跨动物门类适用的矿化外壳来源的单细胞悬液制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述矿化外壳来源于无脊椎动物,所述矿化外壳包括外骨骼、壳体或棘刺。

3.根据权利要求2所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述无脊椎动物包括软体动物、棘皮动物或节肢动物。

4.根据权利要求2所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述无脊椎动物包括扇贝、海胆或蟹。

5.根据权利要求1所述的单细胞悬液制备方法,其特征在于,所述清洗液为磷酸盐缓冲液。

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【专利技术属性】
技术研发人员:王师牛艺霖连姗姗陈晓妹李玉凤戴晓婷张玲玲包振民
申请(专利权)人:中国海洋大学
类型:发明
国别省市:

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