一种用于组织细胞裂解的试剂盒、蛋白提取方法及用途技术

本发明专利技术涉及一种用于组织细胞裂解的试剂盒、蛋白提取方法及用途，包括组织细胞裂解液和玻璃珠，组织细胞裂解液包括如下成分：浓度为3‑6%的H<subgt;2</subgt;O<subgt;2</subgt;双氧水、浓度为0.8‑1.2%的tween20、浓度为0.8‑1.2%的CHAPS试剂、浓度为50‑100mM的Tris‑HCl缓冲液、浓度为150mM的NaCl溶液。本发明专利技术采用组织细胞裂解液与玻璃珠高速碰撞研磨组织细胞的机械破碎技术相结合，可以在室温条件下极短时间内完成蛋白提取，针对各种动植物细胞、组织等生物样本，均可以获得高效、快速、稳定的蛋白样本提取效果，并能够采用OD280紫外吸收法对蛋白样本进行蛋白定量，极大的节省了测定所需的时间成本和试剂成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白提取，尤其涉及一种用于组织细胞裂解的试剂盒、蛋白提取方法及用途。

技术介绍

1、蛋白提取及纯化是生命科学、医学领域，获得天然蛋白质最重要的手段。

2、常见的蛋白提取往往采用ripa裂解液并配合液氮研磨、机械破坏（组织研磨机）、超声破碎、酶消化等多种方式，经历约50-120分钟（不同组织、同时提取不同样本数可能需要更长时间）完成蛋白提取的过程，再结合后续的蛋白定量实验，标准的“待研蛋白样本”制备总体过程往往会超过100分钟，甚至长达3、4个小时。

3、ripa裂解液是一种应用广泛的蛋白提取试剂，具有较好的提取效果和操作便利性，但这种基于sds（十二烷基磺酸钠）及非离子型去污剂相结合的蛋白提取方法，也有着其自身难以克服的问题：

4、1.毒性较大，不适合应用于动物实验或人体实验；

5、2.部分含有细胞壁的细胞组织不能良好裂解，蛋白提取效率低；

6、3.完成蛋白提取后，后续蛋白定量的方法必须采用bca、bradford等方法，而不能用快捷的紫外od280检测方法；p>

7、4.除本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于组织细胞裂解的试剂盒，其特征在于，包括组织细胞裂解液和玻璃珠，所述组织细胞裂解液包括如下成分：浓度为3-6%的H2O2双氧水、浓度为0.8-1.2%的tween20、浓度为0.8-1.2%的CHAPS试剂、浓度为50-100mM的Tris-HCl缓冲液、浓度为150mM的NaCl溶液。

2.一种用于组织细胞裂解的试剂盒的蛋白提取方法，基于权利要求1所述一种用于组织细胞裂解的试剂盒，其特征在于，包括针对动物细胞或G-菌的裂解蛋白提取以及针对动物组织、植物细胞、植物组织或G+菌的裂解蛋白提取，

3.根据权利要求2所述一种用于组织细胞裂解的试剂盒的蛋白提取方...

【技术特征摘要】

1.一种用于组织细胞裂解的试剂盒，其特征在于，包括组织细胞裂解液和玻璃珠，所述组织细胞裂解液包括如下成分：浓度为3-6%的h2o2双氧水、浓度为0.8-1.2%的tween20、浓度为0.8-1.2%的chaps试剂、浓度为50-100mm的tris-hcl缓冲液、浓度为150mm的nacl溶液。

2.一种用于组织细胞裂解的试剂盒的蛋白提取方法，基于权利要求1所述一种用于组织细胞裂解的试剂盒，其特征在于，包括针对动物细胞或g-菌的裂解蛋白提取以及针对动物组织、植物细胞、植物组织或g+菌的裂解蛋白提取，

3.根据权利要求2所述一种用于组织细胞裂解的试剂盒的蛋白提取方法，其特征在于，每100mg的所述动物细胞、g-菌、动物组织、植物细胞、植物组织或g+菌，使用1ml所述组织细胞裂解液。

4.根据权利要求3所述一种用于组织细胞裂解的试剂盒的蛋白提取方法，其特征在于，所述玻璃珠的直径为0.2-0.4mm，涡旋震荡时加入所述动物细胞、g-菌、动物组织、植物细胞、植物组织或g+菌的体积的1-2倍玻璃珠。

5.根据权利要求3所述一种用于组织...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐世文，邓为民，杜伟，
申请(专利权)人：天津纽赛生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：