通过纵向谱系追踪发现抗体制造技术

一种产生对靶抗原特异的抗体的方法，所述方法包括(a)用所述靶抗原对动物进行一轮或多轮免疫；(b)从所述动物的B细胞中采集第一样品；(c)从所述第一样品中的B细胞中鉴定一种或多种与所述抗原特异性结合的第一抗体，并确定遗传元件，所述遗传元件表征第一样品中B细胞的B细胞谱系；(d)用所述靶抗原对所述动物进行一轮或多轮的额外轮次免疫；(e)从所述动物的B细胞中采集第二样品；(f)从第二样品的B细胞中鉴定一种或多种第二样品，第二样品的B细胞与来自第一样品的B细胞来自同一细胞谱系；和(g)测试所述第二抗体与靶抗原的特异性结合。任选地，在某些实施方案中，重复步骤(d)至(g)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

技术介绍

1、(1)

2、本申请一般涉及抗体发现。更具体地说，所述申请旨在发现相同谱系中的抗体。

3、(2)相关领域描述

4、抗体已用于许多应用，其中高亲和力和特异性是其实际应用的关键特性。在免疫系统中，抗体由b细胞产生。在遇到抗原后，初始b细胞扩增和增殖，并在生发中心经历多轮体细胞超突变(shm)和/或基因转换和正/负选择，以产生不同的b细胞集，从而产生与b细胞谱系中较早的抗体相比对靶抗原具有更高亲和力和特异性的抗体(图1，küppersr.，2005)。这种体内亲和力成熟过程通常会增加抗体活性，因为它会在抗体序列中积累越来越多的突变。参见例如，jiang等，2013；kepler等，2014；zhang等，2016；pan等，2023；美国专利7117096b2；美国专利7432063b2；美国专利10101333b2；pct专利公开号wo2020/176815。然而，该过程的主要细胞和分子机制仍然缺乏表征。

5、此外，体内亲和力成熟和其他无偏性筛选方法可以减少通常由常规噬菌体展示筛选过程导致的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种产生对靶抗原特异的抗体的方法，所述方法包括

2.如权利要求1所述的方法，进一步包括

3.如权利要求1或2所述的方法，其中(c)中所述鉴定包括由NGS对所述第一抗体进行测序。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中(c)中所述鉴定包括B细胞淘选和/或噬菌体展示。

5.如前述权利要求1-4中任一项所述的方法，其中(f)中所述第二样品中的B细胞识别所述表征B细胞谱系的遗传元件。

6.如权利要求5所述的方法，其中，所述遗传元件是所述第一抗体的可变区的一部分。

7.如权利要求6所述的方法，其中，所述遗传元件是所述...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种产生对靶抗原特异的抗体的方法，所述方法包括

2.如权利要求1所述的方法，进一步包括

3.如权利要求1或2所述的方法，其中(c)中所述鉴定包括由ngs对所述第一抗体进行测序。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中(c)中所述鉴定包括b细胞淘选和/或噬菌体展示。

5.如前述权利要求1-4中任一项所述的方法，其中(f)中所述第二样品中的b细胞识别所述表征b细胞谱系的遗传元件。

6.如权利要求5所述的方法，其中，所述遗传元件是所述第一抗体的可变区的一部分。

7.如权利要求6所述的方法，其中，所述遗传元件是所述第一抗体的重链和/或轻链的cdr3序列的一部分。

8.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中(f)中所述鉴定包括由ngs对所述第二抗体测序。

9.如权利要求1所述的方法，其中(f)中所述鉴定包括表征b细胞谱系的遗传元件的聚合酶链反应(pcr)。

10.如权利要求9所述的方法，其中，所述遗传元件是所述第一抗体的可变区的一部分。

11.如权利要求10所述的方法，其中，所述遗传元件是所述第一抗体的重链和/或轻链的cdr3序列的一部分。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中(b)中所述收集在(e)中所述收集前至少1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、9个月、12个月、18个月或24个月。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述第一抗体或第二抗体是免疫球蛋白或纳米抗体。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述动物是哺乳动物。

15.如权利要求14所述的方法，其中，所述哺乳动物是骆驼。

16.如权利要求1-15中任一项所述的方法，其中在(c)中鉴定两种或更多种第一抗体。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述第一抗体按cdr序列、谱系和簇分组。

18....

【专利技术属性】
技术研发人员：王信浩，李加国，朱伟民，
申请(专利权)人：浙江纳米抗体技术中心有限公司，
类型：发明
国别省市：