一种重组骆驼刺泛菌及其在发酵生产胞外多糖中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组骆驼刺泛菌及其在发酵生产胞外多糖中的应用，所述的重组骆驼刺泛菌敲除了编码转录因子的基因mdoG；其中，所述转录因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，本发明专利技术通过CRISPR技术构建了高产胞外多糖的重组菌株，该编码转录因子的基因可用于定向改良胞外多糖生产菌株，使得其胞外多糖产量显著高于野生型菌株的产量，为进一步代谢工程改造骆驼刺泛菌生产多糖奠定了基础。本发明专利技术提供的重组菌株构建方法简单，便于使用，利用本发明专利技术构建得到的重组骆驼刺泛菌生产的胞外多糖，在常温下，利用所述的胞外多糖制备得到的10 g/L的胞外多糖水溶液在静态下的粘度为10.32~24.11Pa·s，具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，涉及一种重组骆驼刺泛菌及其在发酵生产胞外多糖中的应用。

技术介绍

1、胞外多糖(exopolysaccharide，eps)是一类碳水化合物聚合物，由微生物发酵产生。由于它们在单糖组成和糖苷键上的多样性，因此，其具有丰富的理化和生物学活性，且广泛应用于食品、医药、高分子材料、化妆品和农业。高分子量的胞外多糖往往具有更好的增稠性和稳定性。具体的，在食品工业中，胞外多糖可作为优良的增稠剂和稳定剂，改善食品的质地和口感，延长保质期；在医药领域，有助于药物的缓慢释放，提高药物的疗效和生物利用度；在高分子材料中，能增强材料的机械性能和耐用性。而高黏度的胞外多糖，在食品中可增加产品的粘稠度，赋予独特的口感；在化妆品中，能形成保护膜，起到保湿和护肤的作用；在农业上，可用于制备保水剂，提高土壤的保水保肥能力。骆驼刺泛菌( pantoea  alhagi)已被用于eps的工业生产。自其基因组序列首次发表以来，其多功能代谢途径及其遗传成分和调控机制已得到广泛研究。为了提高生物技术生产的效率，基于基本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述的重组骆驼刺泛菌敲除了编码转录因子的基因mdoG；其中，所述转录因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述编码转录因子的基因mdoG的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述的重组骆驼刺泛菌的出发菌为骆驼刺泛菌Pantoea alhagi NX-11。

4.根据权利要求1所述的重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述的敲除是利用CRISPR-Cas9技术实现的。

5.权利要求1~4中任意一项...

【技术特征摘要】

1.一种重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述的重组骆驼刺泛菌敲除了编码转录因子的基因mdog；其中，所述转录因子的氨基酸序列如seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述的重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述编码转录因子的基因mdog的核苷酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述的重组骆驼刺泛菌的出发菌为骆驼刺泛菌pantoea alhagi nx-11。

4.根据权利要求1所述的重组骆驼刺泛菌，其特征在于，所述的敲除是利用crispr-cas9技术实现的。

5.权利要求1~4中任意一项所述的重组骆驼刺泛菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，步骤（1）中，所述的sgrna片段的核苷酸序列如seq id no.3所示。

7.权利要求1~4中...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙良，苏胜泽，徐虹，连蒙宇，李振，雷鹏，王瑞，谷益安，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：