血红素-铁蛋白纳米酶及其制备方法与应用技术

技术编号:45840896 阅读:14 留言:0更新日期:2025-07-19 11:05
本发明专利技术涉及铁蛋白功能酶技术领域,具体涉及一种血红素‑铁蛋白纳米酶及其制备方法与应用,包括如下步骤:步骤S1,制备人H亚基铁蛋白和/或HFn‑G160am突变体铁蛋白;步骤S2,将人H亚基铁蛋白和/或HFn‑G160am突变体铁蛋白分别置于缓冲液中,水浴预加热5~10min,得到混合液;步骤S3,向混合液中加入血红素,水浴加热1~1.5h,离心去除沉淀,纯化得到血红素‑铁蛋白纳米酶;本发明专利技术采用野生型人H亚基铁蛋白HFn及其温度敏感型的截短突变体HFn‑G160am,通过温度诱导将具有酶活性的血红素活性中心装载在铁蛋白纳米笼中,制备得到具有高活性的血红素‑铁蛋白纳米酶,进而一步即可检测转铁蛋白受体1,大幅提升了对转铁蛋白受体1的检测效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及铁蛋白功能酶,具体涉及一种血红素-铁蛋白纳米酶及其制备方法与应用


技术介绍

1、转铁蛋白受体1是一种细胞膜上的二聚体跨膜糖蛋白受体,主要介导细胞对转铁蛋白的内吞,调控细胞对铁的摄取。研究表明转铁蛋白受体1在具有高转移、高增殖潜力的癌细胞中过量表达。且在机体主要血液屏障处(如血脑屏障,血睾屏障等)也呈高表达状态。

2、铁蛋白是一类广泛存在于动植物体内的多聚体空心笼状结构蛋白。在生物体内,铁蛋白主要参与铁的存储及快速动员。在哺乳动物体内,铁蛋白还参与免疫细胞的分化等。已有研究表明,人源铁蛋白重链h亚基可与细胞膜上转铁蛋白受体1结合,继而进入细胞或实现跨血液屏障运输。重组人源重链铁蛋白是基于公布的人源铁蛋白h亚基序列直接合成或使用人源细胞经pcr获得序列后,再经原核或真核表达系统获得的重组人h亚基铁蛋白(以下简写成hfn)。人h亚基铁蛋白是由24个大小约为21kda的h亚基组成的具有4-3-2对称的空心笼状结构。其空心结构为药物或检测剂的装载提供了空间。在过去,重组人源重链铁蛋白已经被广泛用于药物递送、体内外肿瘤早期检测、血管通透性检本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种血红素-铁蛋白纳米酶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中制备人H亚基铁蛋白包括:

3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中制备HFn-G160am突变体铁蛋白包括:

4.如权利要求2或3任一项所述的制备方法,其特征在于,

5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S2包括:

6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,

7.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,

8.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,...

【技术特征摘要】

1.一种血红素-铁蛋白纳米酶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤s1中制备人h亚基铁蛋白包括:

3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤s1中制备hfn-g160am突变体铁蛋白包括:

4.如权利要求2或3任一项所述的制备方法,其特征在于,

5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤s2包括:

6....

【专利技术属性】
技术研发人员:许黄涛张同伟林雨楠
申请(专利权)人:江苏生源纳科新材料有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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