一种可利用非天然烟酰胺辅酶的醇脱氢酶及其突变体制造技术

本发明专利技术公开了一种可利用非天然烟酰胺辅酶的醇脱氢酶及其突变体，属于酶工程技术领域。具体地，本发明专利技术首先通过筛选得到一种可利用非天然烟酰胺辅酶实现催化的醇脱氢酶，醇脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，填补了这方面的空白。随后进一步对野生型醇脱氢酶进行改造，以期提高该酶的催化活力以及对非天然烟酰胺辅酶的特异性。最终得到一系列突变体，相对野生型的酶活力最高提升至10.62倍，适用于多种不同种类的非天然烟酰胺辅酶，且以非天然烟酰胺辅酶辅助催化时的辅酶特异性比率最高达6919。因此，以该醇脱氢酶尤其是突变体酶为基础构建含有非天然烟酰胺辅酶的催化体系，为生物合成尤其是醛类物质的合成提供了一种新的工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程，尤其涉及一种可利用非天然烟酰胺辅酶的醇脱氢酶及其突变体。

技术介绍

1、醇脱氢酶(adhs)是至关重要的工业生物催化剂，需要化学计量的辅酶才能进行催化。但是，它们的应用通常受到昂贵的天然辅酶的限制，其中，超过80％都依赖于烟酰胺辅因子nad(p)/nad(p)h。多年来，为了降低辅酶的成本，科研人员通常采用辅酶再生的手段，但这往往会引入不必要的副产品和辅底物，给后续分离提纯造成困难，还有污染环境、原子利用率低以及依赖光敏剂和电子介体等缺点。因而，使用合成简单、价格低廉的非天然烟酰胺辅酶，为醇脱氢酶的催化反应提供氧化还原当量，具有极大的工业应用价值。

2、在此之前，人们已经发现了许多能够利用非天然烟酰胺辅酶的氧化还原酶，比如sulfolobus solfataricus来源的葡萄糖脱氢酶可利用1,4-二氢吡啶衍生物类化合物作为辅酶，但是始终没有醇脱氢酶被明确报道可以利用非天然烟酰胺辅酶。因此，开发并改造获得高效利用烟酰胺类人工辅酶的醇脱氢酶，能够解决依赖nad(p)+的醇脱氢酶催化生物合成的瓶颈问题，对其工业化应用具有重要意本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种醇脱氢酶或其突变体在生物合成中的应用，其特征在于，所述应用包括醇脱氢酶或其突变体利用非天然烟酰胺辅酶实现催化；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述非天然烟酰胺辅酶包括3-氨基甲酰基-1-(4-羧基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(3-羧基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(4-甲基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(2-甲基苄基)吡啶-1-溴化物、1-苄基-3-氨基甲酰基吡啶-1-溴化物、1-(2-苯基)乙基-3-氨基甲酰基吡啶-1-溴化物、1-(3-苯基)丙基-3-氨基甲酰基吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(4-硝基...

【技术特征摘要】

1.一种醇脱氢酶或其突变体在生物合成中的应用，其特征在于，所述应用包括醇脱氢酶或其突变体利用非天然烟酰胺辅酶实现催化；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述非天然烟酰胺辅酶包括3-氨基甲酰基-1-(4-羧基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(3-羧基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(4-甲基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(2-甲基苄基)吡啶-1-溴化物、1-苄基-3-氨基甲酰基吡啶-1-溴化物、1-(2-苯基)乙基-3-氨基甲酰基吡啶-1-溴化物、1-(3-苯基)丙基-3-氨基甲酰基吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(4-硝基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(3-硝基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(2-硝基苄基)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(4-溴)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(3-溴)吡啶-1-溴化物、3-氨基甲酰基-1-(2-溴)吡啶-...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪晔，周婕妤，朱宜纯，顾翔源，王慧茹，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：