一种耐热谷氨酰胺转氨酶及其制备方法技术

本发明专利技术属于谷氨酰胺转氨酶，具体涉及一种耐热谷氨酰胺转氨酶及其制备方法；本发明专利技术的谷氨酰胺转氨酶基因含有SEQ NO:1的氨基酸序列，该基因编码的酶的最适温度，最高比酶活，50℃半衰期，60℃半衰期均高于现有唯一商业化的Streptomyces mobaraensis来源的TGase，且菌种来源新颖，分子量较小，能够有效交联大豆分离蛋白，具有巨大的研究潜力和应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于谷氨酰胺转氨酶，具体涉及一种耐热谷氨酰胺转氨酶及其制备方法

技术介绍

1、谷氨酰胺转氨酶(ec 2.3.2.13,tgase)通过酰基转移反应催化蛋白质中ε-(γ-谷氨酰基)赖氨酸异肽键的形成，酰基供体与赖氨酸残基的ε-氨基等酰基受体发生交联，导致分子内或分子间交联。tgase凭借优异的蛋白交联特性而在食品、医学、生物工程等多个领域具有巨大应用潜力。

2、自1989年茂源链霉菌(streptomyces mobaraensis)的tgase(smtg)被报道后，其他微生物等来源的tgase陆续被研究人员发现，目前被鉴定的tgase基因来源较为单一，主要分布于链霉菌属和芽孢杆菌属。目前市售的tgase均来源于链霉菌属，最适温度一般在50℃左右，60℃下半衰期t1/2低于两分钟(doi：10.1007/s00726-011-1015-y)。然而，在许多应用中，tgase通常暴露在高温下。例如，豆腐加工中的交联反应需要在50℃下进行(https://doi.org/10.1016/j.lwt.2010.10.020)，而牛肉凝胶通常在6本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种耐热谷氨酰胺转氨酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ NO:1所示。

2.一种耐热谷氨酰胺转氨酶片段，其特征在于，其由权利要求1所述的耐热谷氨酰胺转氨酶经中性蛋白酶处理获得。

3.根据权利要求2所述的一种耐热谷氨酰胺转氨酶片段，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ NO:2所示。

4.一种重组质粒pET-22b(+)，其特征在于，其含有优化后密码子，其核苷酸序列如SEQNO:3所示。

5.一种重组大肠杆菌，其特征在于，其含有权利要求4所述的重组质粒pET-22b(+)。

6.根据权利要求5所述的重组大肠杆菌，其特征在于，其以...

【技术特征摘要】

1.一种耐热谷氨酰胺转氨酶，其特征在于，其氨基酸序列如seq no:1所示。

2.一种耐热谷氨酰胺转氨酶片段，其特征在于，其由权利要求1所述的耐热谷氨酰胺转氨酶经中性蛋白酶处理获得。

3.根据权利要求2所述的一种耐热谷氨酰胺转氨酶片段，其特征在于，其氨基酸序列如seq no:2所示。

4.一种重组质粒pet-22b(+)，其特征在于，其含有优化后密码子，其核苷酸序列如seqno:3所示。

5.一种重组大肠杆菌，其特征在于，其含有权利要求4所述的重组质粒pet-22b(+)。

6.根据权利要求5所述的重组大肠杆菌，其特征在于，其以e.coli bl21(de3)为宿主。

7.一种生产谷氨酰胺转氨酶的方法，其特征在于，以权利要求5或...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈秋铭，罗文杰，陈洁，何志勇，曾茂茂，王召君，秦昉，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：