鼠源肝纤维化类器官体外模型的构建方法和应用技术

鼠源肝纤维化类器官体外模型的构建方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术提供了鼠源肝纤维化类器官模型的制备方法：将健康小鼠肝脏组织解离消化为单细胞，利用微流控‑3D打印设备制备鼠肝类器官，通过APAP、TAA和TGF‑β1诱导构建鼠源肝纤维化类器官模型。本发明专利技术还提供了一种在小鼠体内构建肝纤维化，再取材提取细胞后用微流控‑3D打印设备制备肝纤维化类器官。本发明专利技术提供的两种鼠源肝纤维化类器官均能在体外高度模拟肝纤维化特征，具有通量高、均一性强、建模周期短的优势，适用于肝脏纤维化疾病的机制靶点研究及药物研发。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，具体涉及鼠源肝纤维化类器官的构建方法和应用。

技术介绍

1、肝纤维化(liver fibrosis)是由慢性病毒性乙型肝炎和丙型肝炎、自身免疫性肝炎、酒精性肝病、原发性胆汁性胆管炎、原发性硬化性胆管炎和非酒精性脂肪性肝病等疾病造成的慢性肝脏炎症引起的细胞外基质(ecm)积累形成纤维瘢痕。肝纤维化可能发展为肝硬化，并进一步发展为肝细胞癌(hcc)。因此，治疗潜在的肝脏疾病可以改善肝纤维化，尽管已经研究出了肝纤维化的许多靶点，但尚未开发出有效的药物。因此，探索肝纤维化的确切病理生理学对于更好地理解和发现新的治疗靶点至关重要。

2、目前，肝纤维化的研究大多使用2d细胞培养和体内小鼠模型。传统的2d体外纤维化模型仅限于使用一种类型的细胞，例如肌成纤维细胞、成纤维细胞或星状细胞，它们并不代表人体组织的复杂性，无法完全复制体内多细胞微环境。尽管动物研究在开发抗纤维化治疗方面取得了重大成就，但动物模型成本较高，周期较长。因此，非常需要模拟肝脏复杂性和更好地模拟纤维化病理生理学的新型体外模型。这种需求导致了更复杂的三维(3d)体外模型的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种肝纤维化类器官体外模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种肝纤维化类器官体外模型的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述肝脏组织解离消化为单细胞的具体步骤为：取肝脏组织，用PBS清洗后剪成小块，加入消化液进行消化，直到符合解离标准，加入与消化液等体积的含10％FBS的DMEM/F12培养基终止消化，细胞筛网过滤，收集滤液，滤液离心弃上清，然后加入红细胞裂解液，裂解结束后，终止，离心弃上清，收集沉淀即得；

3.如权利要求1所述的一种肝纤维化类器官体外模型的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述肝脏组织为小鼠的肝脏组织；

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【技术特征摘要】

1.一种肝纤维化类器官体外模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种肝纤维化类器官体外模型的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述肝脏组织解离消化为单细胞的具体步骤为：取肝脏组织，用pbs清洗后剪成小块，加入消化液进行消化，直到符合解离标准，加入与消化液等体积的含10％fbs的dmem/f12培养基终止消化，细胞筛网过滤，收集滤液，滤液离心弃上清，然后加入红细胞裂解液，裂解结束后，终止，离心弃上清，收集沉淀即得；

3.如权利要求1所述的一种肝纤维化类器官体外模型的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述肝脏组织为小鼠的肝脏组织；

4.如权利要求1所述的一种肝纤维化类器官体外模型的构建方法，其特征在于，步骤(4)...

【专利技术属性】
技术研发人员：王进，代小勇，蔡咏德，严秀，黄怡彬，
申请(专利权)人：深圳市西格诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：