【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及体内代谢物浓度定量分析领域，具体涉及一种基于液相色谱串联质谱法测定全血中2,3-二磷酸甘油酸含量的方法。
技术介绍
1、2,3-二磷酸甘油酸(2,3-diphosphoglycerate，简称2,3-dpg)是哺乳动物类包括人类红细胞中糖酵解代谢旁路的重要中间产物，可以调节血红蛋白上氧气的运输和释放，一般生物体内全血的2,3-二磷酸甘油酸浓度在800～1800μg/ml左右。在多种生理和病理情况下，2,3-dpg的浓度会发生变化以适应机体的需氧代谢量，是临床诊断和治疗中一个值得关注的参考指标。
2、目前，2,3-二磷酸甘油酸的浓度检测通常使用elisa试剂盒检测，采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验，最后使用酶标仪或分光光度计测定吸光度后计算。elisa试剂盒检测法有一些不可避免的缺点，例如重复性较低、灵敏度不高、特异性受限导致假阳性、假阴性等等。
3、2,3-二磷酸甘油酸属于含有高能磷酸键且极性较大的化合物，化合物不稳定，且易与金属物质发生吸附和相互作用，使液相色谱串联质谱法的方法开发具有较大难度。鉴...
【技术保护点】
1.一种基于液相色谱串联质谱法测定全血中2,3-二磷酸甘油酸含量的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(2)测定含量过程中，还包括质控程序，具体步骤为：
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤a所述乙腈水溶液的浓度为50％，所述系列浓度的标曲工作液、空白基质、内标工作液、水和甲醇的体积比为1：9：20：80：550；沉淀后离心的上清与乙腈的体积比为1：1。
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于：所述系列浓度的标曲工作液中2,3-二磷酸甘油酸的浓度为2.5～25mg/mL。
<...【技术特征摘要】
1.一种基于液相色谱串联质谱法测定全血中2,3-二磷酸甘油酸含量的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(2)测定含量过程中，还包括质控程序，具体步骤为：
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤a所述乙腈水溶液的浓度为50％，所述系列浓度的标曲工作液、空白基质、内标工作液、水和甲醇的体积比为1：9：20：80：550；沉淀后离心的上清与乙腈的体积比为1：1。
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于：所述系列浓度的标曲工作液中2,3-二磷酸甘油酸的浓度为2.5～25mg/ml。
5.根据权利要求1～3任一项所述方法，其特征在于：所述空白基质为动物空白血浆或血清，优选空白小鼠血浆；所述内标工作液为含0.05～0.15mg/ml 2,3-二磷酸甘油酸-13c3和5％偏磷酸的水溶液；所述内标工作液、水、甲醇和乙腈在使用前冰浴。
6.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于：所述沉淀的方法为涡旋震荡5～10min；所述离心为16000rpm 4℃离心3～8min。
7.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤b所述色谱条件中...
【专利技术属性】
技术研发人员：王灿，徐磊，彭红英，王晖，刘柏梅，
申请(专利权)人：成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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