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一种免分离和信号放大的细胞外囊泡定量分析方法技术

技术编号:45719983 阅读:17 留言:0更新日期:2025-07-04 18:41
本发明专利技术公开了一种免分离和信号放大的细胞外囊泡定量分析方法,包括如下步骤:将巯基修饰的适配体通过Au‑S键组装到金纳米颗粒表面,形成金纳米颗粒‑适配体复合物;所述适配体根据细胞外囊泡上特异性膜蛋白受体设计得到;将金纳米颗粒‑适配体复合物与细胞外囊泡待测液进行孵育,孵育后,金纳米颗粒‑适配体复合物特异性结合EVs,形成大颗粒复合物;在激光照射下,利用相机记录待测液的丁达尔效应,并用图像分析软件读取丁达尔效应强度值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生化分析,特别涉及一种免分离和信号放大的细胞外囊泡定量分析方法


技术介绍

1、细胞外囊泡(evs)是由细胞释放到细胞外空间的膜结构的纳米囊泡,是最佳的细胞与细胞之间的通讯信使。更重要的是,evs携带着大量亲代细胞的分子信息,如跨膜蛋白、细胞质蛋白、mrna、dna以及micrornas等,在指示疾病尤其是癌症的生理状态变化方面起着重要的作用,被认为是最具潜力的疾病检测生物标志物之一。此外,其具有良好的生物相容性、靶向性、低成瘤风险,被广泛应用于药物递送和疾病治疗的载体。在这些研究过程中,首要任务是实现细胞外囊泡的定量检测。

2、近年来,一系列优异的evs定量分析方法被相继报道,如直接计数的方法(纳米粒度分析仪,纳米流式细胞仪等)已经成为定量分析evs的常用方法。除了仪器成本高昂和无选择性的主要缺点外,这些方法受到脂蛋白颗粒和蛋白聚集体的干扰导致计数准确度低。此外,质谱和免疫分析(如western blot和elisa)、微流控、电化学平台等已经被用于evs的准确分析,尽管这些方法在分析性能方面取得了显著的改进,但他们仍然依赖于昂本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种非疾病诊断目的的免分离和信号放大的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,所述金纳米颗粒的粒径为20~60nm。

3.根据权利要求1所述的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,所述细胞外囊泡待测液在与金纳米颗粒-适配体复合物混合孵育前,经过稀释以及离心处理。

4.根据权利要求1所述的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,丁达尔效应强度与细胞外囊泡浓度的对数值的线性关系为:ΔGI=-236.7+34.6lgCEVs,R2=0.980,其中,ΔGI为实际测得的丁达尔效应强度值与背景...

【技术特征摘要】

1.一种非疾病诊断目的的免分离和信号放大的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,所述金纳米颗粒的粒径为20~60nm。

3.根据权利要求1所述的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,所述细胞外囊泡待测液在与金纳米颗粒-适配体复合物混合孵育前,经过稀释以及离心处理。

4.根据权利要求1所述的细胞外囊泡定量分析方法,其特征在于,丁达尔效应强度与细胞外囊泡浓度的对数值的线性关系为:δgi=-236.7+34.6lgcevs,r2=0.980,其中,δgi为实际测得的丁达尔效应强度值与背景信号丁达尔效应...

【专利技术属性】
技术研发人员:张浪蒋欣庆陈卓郑雅心邢瑶戴谦
申请(专利权)人:川北医学院
类型:发明
国别省市:

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