用于细胞整合素感知环境配体高度变化的探针HGT、试剂盒以及应用制造技术

本发明专利技术提供了用于细胞整合素感知环境配体高度变化的探针height gauge tether （HGT）、试剂盒以及应用，将双链DNA探针的高度进行改变为1‑bp、18‑bp、24‑bp和30‑bp，长度范围为0.5～10nm。将2个高度不同的探针进行组合实验，检测细胞是否能感知配体的高度变化。本发明专利技术利用1bp和18bp的组合，18bp和30bp的组合，24bp和30bp的组合均发现整合素能够感知配体高度且灵敏度在1到2nm。另外，本发明专利技术通过实验验证，细胞感知配体高度性质具有普适性，细胞骨架硬度和整合素状态能够调节整合素配体高度的偏好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞整合素，特别地，涉及用于细胞整合素感知环境配体高度变化的探针height gauge tether （hgt）、试剂盒以及应用。

技术介绍

1、整合素作为细胞膜上的力敏感受体，在细胞与细胞外基质（ecm）的相互作用中起着关键作用。它们不仅能够感知ecm中的力学信号，还能将这些信号通过细胞骨架传递到细胞核，从而调控细胞的黏附、铺展、迁移和分化等行为。

2、目前的研究主要集中在整合素对配体水平间距的感知（如配体间距小于70nm时整合素形成簇），但对于配体在垂直高度上的变化如何影响整合素的感知和组织形式，尚未有系统的研究。ecm不仅在水平方向上具有复杂的空间分布，还在垂直方向上具有高度变化（如不同厚度的纤维网络、不同深度的配体分布等）。现有的实验技术难以精确控制和模拟这种配体的高度变化，导致无法全面理解整合素在垂直方向上的感知机制。组织染色发现，细胞的黏附配体在显微网络中是立体分布的，其对细胞功能的调控是复杂的。鉴于配体广泛应用到生物材料的设计中，我们需要考虑在进行生物材料模型设计时，考虑配对的空间分布信息，这对于精准的生物医工调控本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于细胞整合素感知环境配体高度变化的探针HGT的制备方法，选择对应不同高度的ssDNA top链，与cRGDfk、N3-PEG-NHS混合反应，得到带有cRGD的ssDNA上链，再将其与ssDNA bottom链混合，室温退火，即得；所述探针的高度为1-bp、18-bp、24-bp和30-bp，ssDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～9所示，并且，所有ssDNA top链的5’或3’端具有炔偶联。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述探针的长度范围为0.5～10nm。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，ssDNA top链、c...

【技术特征摘要】

1.用于细胞整合素感知环境配体高度变化的探针hgt的制备方法，选择对应不同高度的ssdna top链，与crgdfk、n3-peg-nhs混合反应，得到带有crgd的ssdna上链，再将其与ssdna bottom链混合，室温退火，即得；所述探针的高度为1-bp、18-bp、24-bp和30-bp，ssdna的核苷酸序列如seq id no.1～9所示，并且，所有ssdna top链的5’或3’端具有炔偶联。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述探针的长度范围为0.5～10nm。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，ssdna top链、crgdfk、n3-peg-nhs的摩尔比为1：30：3；ssdna top链与ssdna bottom链的摩尔比为1.1：1。

4.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王永亮，刘肖君，李潮，韩文伟，
申请(专利权)人：康复大学，
类型：发明
国别省市：