一种用于检测L-苏氨酸的生物传感器的开发及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测L‑苏氨酸的生物传感器的开发及其应用，属于遗传工程领域。本发明专利技术提供了一种新型的苏氨酸生物传感器的构建方法以及通过生物传感器辅助筛选L‑苏氨酸高产突变体的应用方法。该生物传感器可以灵敏的检测L‑苏氨酸的浓度变化。与高通量筛选体系相结合，可以快速地筛选生产性能提高的L‑苏氨酸高产菌株突变体。借助该生物传感器从L‑苏氨酸生产菌株LMT4突变体文库中成功筛选了一种L‑苏氨酸高产突变体LMTM35，在5L发酵罐中经过45h积累了166g/L L‑苏氨酸，糖酸转化率0.67g/g。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于检测l-苏氨酸的生物传感器的开发及其应用，属于遗传工程领域。

技术介绍

1、l-苏氨酸是一种重要的必需氨基酸，广泛应用于医药、食品和饲料等领域，尤其在动物饲料中被作为重要的营养添加剂，以提高蛋白质利用率和促进动物生长，其市场需求持续增长。然而，目前l-苏氨酸的生产主要依赖微生物发酵法，这种方法主要以大肠杆菌作为生产宿主。尽管工业化生产的工艺已逐步成熟，但发酵效率和l-苏氨酸产量仍然有限，亟需进一步优化以满足市场需求。

2、大肠杆菌(escherichia coli)是一种重要的工业微生物，因其遗传背景清晰、生长速度快、易于基因操作等特点，被广泛应用于代谢工程和工业发酵领域。近年来，合成生物学和系统代谢工程的快速发展为大肠杆菌的理性改造提供了有效手段，可以快速获得高产l-苏氨酸的工程菌株。然而，大肠杆菌的l-苏氨酸合成途径受到复杂的代谢网络和未知的多层次调控的限制。利用生物传感器结合高通量筛选技术筛选化学品高产突变体，已成为进一步提高产品得率的可用策略。因此，开发一种灵敏的l-苏氨酸生物传感器来辅助筛选高产l-苏氨酸突变体有本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种CysB蛋白突变体，其特征在于，所述CysB蛋白突变体是在对应于亲本CysB蛋白的氨基酸序列的基础上，将第138位的氨基酸由缬氨酸突变为丙氨酸后得到的；

2.编码权利要求1所述的CysB蛋白突变体的多核苷酸或携带所述多核苷酸的载体或表达所述权利要求1所述的CysB蛋白突变体的细胞。

3.一种提高L-苏氨酸生物传感器对L-苏氨酸的响应阈值的方法，其特征在于，所述方法为，采用含有权利要求1所述的CysB蛋白突变体的载体构建L-苏氨酸生物传感器；所述生物传感器为含有权利要求1所述的CysB蛋白突变体、PcysB启动子、cysK基因上游完整的非编码区序列、荧光蛋白...

【技术特征摘要】

1.一种cysb蛋白突变体，其特征在于，所述cysb蛋白突变体是在对应于亲本cysb蛋白的氨基酸序列的基础上，将第138位的氨基酸由缬氨酸突变为丙氨酸后得到的；

2.编码权利要求1所述的cysb蛋白突变体的多核苷酸或携带所述多核苷酸的载体或表达所述权利要求1所述的cysb蛋白突变体的细胞。

3.一种提高l-苏氨酸生物传感器对l-苏氨酸的响应阈值的方法，其特征在于，所述方法为，采用含有权利要求1所述的cysb蛋白突变体的载体构建l-苏氨酸生物传感器；所述生物传感器为含有权利要求1所述的cysb蛋白突变体、pcysb启动子、cysk基因上游完整的非编码区序列、荧光蛋白的载体；

4.一种l-苏氨酸生物传感器，其特征在于，所述生物传感器中含有权利要求1所述的cysb蛋白突变体。

5.根据权利要求4所述的l-苏氨酸生物传感器，其特征在于，所述生物传感器是携带pc...

【专利技术属性】
技术研发人员：饶志明，赵振强，陈坚，徐美娟，杨套伟，尤甲甲，乔郅钠，陈宁，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：