一种诱导人脂肪干细胞分化为胰岛素分泌细胞的方法技术

技术编号:45712237 阅读:14 留言:0更新日期:2025-07-04 18:30
本发明专利技术公开了一种诱导人脂肪干细胞分化为胰岛素分泌细胞的方法,从人脂肪组织中分离提取人脂肪干细胞并使其自聚;将自聚成球的人脂肪干细胞置于诱导分化培养基中进行第一阶段诱导,得到第一诱导分化体系;向第一诱导分化体系中补充维甲酸和转化因子β1,同时结合近红外光照射进行协同诱导得到第二诱导分化体系;向第二诱导分化体系中补充牛磺酸、β细胞素、胰岛素样生长因子、烟酰胺和BMPI型受体激酶抑制剂,同时通过近红外光照射进行协同诱导即可得到胰岛素分泌细胞。本发明专利技术所述方法显著提高了细胞分化效率,为人脂肪干细胞向胰岛素分泌细胞的分化及其应用提供了新的理论依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种诱导人脂肪干细胞分化为胰岛素分泌细胞的方法


技术介绍

1、糖尿病是一种慢性代谢性疾病,病因主要是由于患者体内胰岛素分泌不足,导致机体无法维持正常的葡萄糖代谢平衡,因而出现高血糖症状。糖尿病传统的治疗方法多为外源性胰岛素注射,然而该方法并不能达到原生胰岛细胞提供的生理性血糖控制效果,且无法摆脱药物控制。干细胞具有自我更新、无限增殖及多向分化潜能等特点,在体外诱导条件下能成功分化为具有类似胰岛β细胞功能的胰岛素分泌细胞。这类由干细胞分化而成的胰岛素分泌细胞移植为糖尿病的治疗提供了新方案。

2、人脂肪干细胞来源丰富、获取容易且具有低免疫原性,是分化为胰岛素分泌细胞的重要细胞来源。目前诱导人脂肪干细胞分化为胰岛素分泌细胞的方法主要包括一步诱导法和分步诱导法。其中一步诱导法无需更换培养基,操作简单,但因同时添加的多种诱导因子会对不同阶段的细胞分化产生影响,导致细胞定向分化效率较低;分步诱导法可避免不同阶段诱导因子对细胞分化的影响,但需要多次更换培养基,诱导过程复杂,且诱导周期较长。


<p>技术实现思本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种诱导人脂肪干细胞分化为胰岛素分泌细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤一中所述胶原酶为1 mg/mL胶原酶Ⅳ。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤一中所述含血清培养基为10%胎牛血清αMEM培养基。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤二中所述诱导分化培养基配方为DMEM/F12基础培养基、3%胎牛血清(FBS)、100 ng/mL激活素A。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤三中所述维甲酸最终质量浓度为1~5mg/L,转化因子β1最终质量浓度为2~2...

【技术特征摘要】

1.一种诱导人脂肪干细胞分化为胰岛素分泌细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤一中所述胶原酶为1 mg/ml胶原酶ⅳ。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤一中所述含血清培养基为10%胎牛血清αmem培养基。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤二中所述诱导分化培养基配方为dmem/f12基础培养基、3%胎牛血清(fbs)、100 ng/ml激活素a。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤三中所述维甲酸...

【专利技术属性】
技术研发人员:王伟郭建斌祝邵民景云瑞马超
申请(专利权)人:陕西卓杰体康生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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