一种提高L-高丝氨酸产量的重组大肠杆菌及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种提高L‑高丝氨酸产量的重组大肠杆菌及其制备方法，属于生物技术领域。本发明专利技术通过构建多途径葡萄糖转运系统增强L‑高丝氨酸合成前体供给、敲除高耗能基因并增强ATP再生提高ATP可用性、建立乙酸转化途径与阻断L‑高丝氨酸降解途径进一步强化合成通路代谢流、引入丙酮酸羧化酶突变体与设计启动子弱化柠檬酸合酶的表达重构关键代谢节点、根据菌株代谢特性优化其在5L生物反应器中的补料分批发酵条件，得到一株遗传背景清晰、不携带质粒、无需诱导且能稳定高效生产L‑高丝氨酸的基因工程菌，在5L发酵罐中发酵56h L‑高丝氨酸产量达到141.5g/L，糖酸转化率达到40％，具有一定的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种提高l-高丝氨酸产量的重组大肠杆菌及其制备方法，属于生物。

技术介绍

1、l-高丝氨酸是一种有价值的非蛋白质氨基酸，具有重要的生理学功能和应用价值。同时也是l-苏氨酸、l-赖氨酸和l-蛋氨酸生物合成的前体。其具有抗氧化、免疫调节、促进生长和发育等重要功能，在化工、医药、农业等领域中都有广泛的应用。目前，l-高丝氨酸主要通过化学法合成。而微生物发酵法具有成本低、工艺简单、条件温和、对环境影响相对较小等优势，更适合用于l-高丝氨酸的大规模工业生产。

2、目前，对于微生物发酵生产l-高丝氨酸的研究主要集中在谷氨酸棒状杆菌和大肠杆菌中。li等(ning l,lihong l,shiqin y,et al.dual-channel glycolysis balancescofactor supply for l-homoserine biosynthesis in corynebacteriumglutamicum.bioresource technology,2023,369128473-128473.)研究了通过构建双通道糖酵解平衡本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种葡萄糖转运蛋白突变体，其特征在于，所述葡萄糖转运蛋白突变体是在对应于SEQ ID NO.11所示的亲本葡萄糖转运蛋白的氨基酸序列的基础上，第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，或第162位的缬氨酸突变为丝氨酸，或第383位的色氨酸突变为丝氨酸，或第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，同时将第162位的缬氨酸突变为丝氨酸，或第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，同时将第383位的色氨酸突变为丝氨酸。

2.编码权利要求1所述的葡萄糖转运蛋白突变体的多核苷酸或携带所述多核苷酸的载体或表达所述权利要求1所述的葡萄糖转运蛋白突变体的细胞。

3.一种多核苷酸合成试剂盒，其特征在于，包含...

【技术特征摘要】

1.一种葡萄糖转运蛋白突变体，其特征在于，所述葡萄糖转运蛋白突变体是在对应于seq id no.11所示的亲本葡萄糖转运蛋白的氨基酸序列的基础上，第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，或第162位的缬氨酸突变为丝氨酸，或第383位的色氨酸突变为丝氨酸，或第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，同时将第162位的缬氨酸突变为丝氨酸，或第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，同时将第383位的色氨酸突变为丝氨酸。

2.编码权利要求1所述的葡萄糖转运蛋白突变体的多核苷酸或携带所述多核苷酸的载体或表达所述权利要求1所述的葡萄糖转运蛋白突变体的细胞。

3.一种多核苷酸合成试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述葡萄糖转运蛋白突变体。

4.一种提高葡萄糖转运蛋白对葡萄糖的转运能力的方法，其特征在于，所述方法为，在对应于seq id no.11所示的亲本葡萄糖转运蛋白的氨基酸序列的基础上，第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，或第162位的缬氨酸突变为丝氨酸，或第383位的色氨酸突变为丝氨酸，或第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，同时将第162位的缬氨酸突变为丝氨酸，或第165位的丙氨酸突变为亮氨酸，同时将第383位的色氨酸突变为丝氨酸。

5.一种提高重组菌株的葡萄糖消耗速率与糖酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：饶志明，刘知非，陈坚，蔡萌萌，陈宁，乔郅钠，尤甲甲，徐美娟，张显，杨套伟，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：