【技术实现步骤摘要】
本披露属于生物，更具体地，本披露涉及一种针对非对称多特异性抗体进行细胞株筛选的方法，具体涉及一种利用均相时间分辨荧光技术筛选具有titin链和obscurin链的非对称多特异性抗体的细胞株的方法。
技术介绍
1、这里的陈述仅提供与本披露有关的背景信息，而不必然地构成现有技术。
2、在常规非对称多特异性抗体基础上，利用细胞中的titin链和obscurin链形成的异源二聚体对某个抗体中的ch1和cl进行替换，形成非对称多特异性抗体。该抗体平台可以有效地防止非对称多特异性抗体的重链和轻链间错配(wo2021139758a1、wo2022237882a1)。但是在细胞株的筛选过程中，依然会有重链错配，掉轻链及半抗等多种副产物存在，部分副产物在下游纯化过程中难以除去，不仅提高了生产成本，而且还可能影响药物推进到临床的速度。这些异常结构的副产物在细胞株筛选早期无法通过高效的方法筛选，从而会增加非对称多特异性抗体细胞株筛选难度，造成非对称双特异性抗体筛选通量增加，筛选周期延长等问题。
3、均相时间分辨荧光技术(htrf)是一...
【技术保护点】
1.一种针对非对称多特异性抗体进行细胞株筛选的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤1包含利用Titin和/或Obscurin蛋白免疫小鼠，并通过杂交瘤的方式获得结合非对称多特异性抗体的抗Titin&Obscurin抗体的操作；优选地，其中所述Titin蛋白包含选自由SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：168至SEQ ID NO：186组成的组的氨基酸序列，所述Obscurin蛋白包含选自由SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：187至SEQID NO：227组成的组的氨基酸序列。
3.根...
【技术特征摘要】
1.一种针对非对称多特异性抗体进行细胞株筛选的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤1包含利用titin和/或obscurin蛋白免疫小鼠，并通过杂交瘤的方式获得结合非对称多特异性抗体的抗titin&obscurin抗体的操作；优选地，其中所述titin蛋白包含选自由seq id no：4、seq id no：168至seq id no：186组成的组的氨基酸序列，所述obscurin蛋白包含选自由seq id no：3、seq id no：187至seqid no：227组成的组的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述样品为细胞上清液或待测物。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述步骤2的配对方案包含：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述抗人轻链λ或κ抗体为商品化抗人轻链λ或κ抗体。
6.根据权利要求5所述的方法，其中在步骤2还包含将所述抗titin&obscurin抗体和商品化抗人轻链λ或κ抗体与细胞上清液或待测物混合孵育的操作。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述孵育的时间为2小时及以上；优选地，所述孵育时间为2小时至12小时。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述孵育为室温孵育2小时或4℃过夜孵育；优选地，...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴玉婷，未祥，迟虹，
申请(专利权)人：江苏恒瑞医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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