RSV F蛋白突变体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及RSV F蛋白突变体及其应用，属于疫苗领域。基于野生型RSV F蛋白的氨基酸序列，本发明专利技术进行了多个方面、多种方式的改造，包括二硫键突变、脯氨酸突变、空腔填充突变、静电突变、p27序列改造和/或三聚化结构域改造，设计得到了多种RSV F蛋白突变体。然后，通过进行基因合成、表达和ELISA检测，本发明专利技术对RSV F蛋白突变体的融合前构象（pre‑F）比例、高温和低温条件下稳定性进行了测试，筛选出融合前构象比例较高且结构稳定的若干RSV F蛋白突变体。最后，选择候选抗原代表进行了免疫原性检测，证明了其具有较好的免疫原性，可用于开发RSV疫苗、制备RSV特异性抗体或RSV检测试剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及rsv f蛋白突变体及其应用，属于疫苗领域。

技术介绍

1、呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus, rsv）是一种单股负链rna病毒，属副黏病毒科，有a、b两种亚型。rsv为直接接触传播，感染后可引起支气管炎、肺炎、哮喘及呼吸衰竭等症状。rsv是引起全球儿童呼吸道感染的首要病原体，也可引起婴幼儿、老年人及免疫功能受损人群呼吸道及肺部严重感染。目前有两款国外上市的人源化单克隆抗体（palivizumab帕利珠单抗和nirsevimab尼塞韦单抗）用于帮助预防rsv感染，但此种被动免疫形成的保护持续时间较短，需多次注射且单克隆抗体价格十分昂贵。预防性疫苗方面国外已有三款rsv疫苗获批上市，包括gsk公司的arexvy，辉瑞公司的abrysvo以及modena公司的mresvia，但国内尚无上市的rsv预防性疫苗。因此，开发安全高效且经济实惠的疫苗对预防和控制rsv感染具有重要的意义。

2、rsv基因组长15.2kb，编码11个蛋白。其中黏附蛋白（attachment protein, g)和融合蛋白（本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种RSV F蛋白突变体，其存在相对于的野生型RSV F蛋白的多种修饰以使之稳定在融合前构象，所述修饰包含：

2.权利要求1所述的RSV F蛋白突变体，其特征在于，所述p27序列改造选自以下之一：T103-GS-G145、S/N105-A147。

3.权利要求1所述的RSV F蛋白突变体，其特征在于，所述修饰还包含三聚化结构域改造：删除跨膜区及胞内区并添加包含三聚化结构域的序列。

4.权利要求3所述的RSV F蛋白突变体，其特征在于，所述三聚化结构域选自Foldon，其具有SEQ ID NO: 2所示的序列。

5.权利要求1-4任一项所...

【技术特征摘要】

1.一种rsv f蛋白突变体，其存在相对于的野生型rsv f蛋白的多种修饰以使之稳定在融合前构象，所述修饰包含：

2.权利要求1所述的rsv f蛋白突变体，其特征在于，所述p27序列改造选自以下之一：t103-gs-g145、s/n105-a147。

3.权利要求1所述的rsv f蛋白突变体，其特征在于，所述修饰还包含三聚化结构域改造：删除跨膜区及胞内区并添加包含三聚化结构域的序列。

4.权利要求3所述的rsv f蛋白突变体，其特征在于，所述三聚化结构域选自foldon，其具有seq id no: 2所示的序列。

5.权利要求1-4任一项所述的rsv f蛋白突变体，其特征在于，所述修饰包含以下任意一组或由任意一组组成：

6.权利要求5所述的rsv f蛋白突变体，其特征在于，所述rsv f蛋白突变体的氨基酸序列包含或者是seq id no: 46、47、50、58、64、65或73所示序列。

7.核酸分子，其编码权利要求1-6任一项所述的rsv f蛋白突变体。

8.重组载体，其包含权利要求7所述的核酸分子。

9.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶璐，张年，张超，黄放，王倩，黄倩，何刚，周冬梅，张敬武，韩振，段梦奇，
申请(专利权)人：复星安特金成都生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：