一种寡肽序列倍增的PCR扩增及其原核蛋白高效表达和纯化的方法技术

技术编号:45623904 阅读:19 留言:0更新日期:2025-06-24 18:49
本发明专利技术公开了一种寡肽序列倍增的PCR扩增及其原核蛋白高效表达和纯化的方法。本发明专利技术提供的方法,包括A1)设计合成扩增模板和引物;第一轮扩增引物对由引物F1和引物R1组成;所述引物F1和R1的长度均为所述寡肽的编码核酸的1.2‑1.8倍;所述第二轮扩增引物对由引物F2和引物R2组成;所述引物F2和R2的长度均为所述寡肽的编码核酸的1.2‑1.8倍;A2)第一轮PCR扩增,实现寡肽编码核酸倍增或寡肽编码核酸重复串联的PCR;本发明专利技术通过寡肽序列倍增的PCR扩增设计思路,不仅能够扩增出GnRH30,包括GnRH50也可以成功扩增,这是以往研究所不能达到的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学和基因工程领域,涉及一种寡肽序列倍增的pcr扩增及其原核蛋白高效表达和纯化的方法。


技术介绍

1、在分子生物学和基因工程领域,重组蛋白的高效表达和纯化是生物医药和生物技术中的重要课题。特别是在寡肽类蛋白的表达过程中,如何扩大寡肽类抗原的免疫原性、精确地构建重复寡肽序列并有效表达这些序列,仍然是当前技术的难点之一。通常,寡肽由多个短小的氨基酸序列组成,这些短片段的精确复制和高效串联构建,成为表达系统中至关重要的一步。

2、目前,针对寡肽序列的重复构建,传统的pcr扩增技术在处理短片段dna序列时往往面临低效率和高错误率的问题。尤其是对于含有重复序列dna片段扩增,pcr反应的特异性和稳定性进一步降低,容易导致扩增产物的质量问题。这使得在构建高重复次数、长串联的寡肽序列时,难以保证扩增精度和稳定性。此外,现有技术普遍依赖于化学合成或高成本的限制性酶切位点的分子拼接技术来构建重复序列,这些方法不仅操作复杂,且成本高昂,难以满足大规模生产和高效表达的需求。

3、如gnrh寡肽,是由10个氨基酸残基组成的单体肽,其具有本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种寡肽编码核酸倍增的方法或寡肽编码核酸重复串联的PCR方法,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:

3.一种由多个寡肽串联得到复合肽的制备方法,包括如下步骤:

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于:

6.根据权利要求3-5任一所述的方法,其特征在于:

7.根据权利要求3-6任一所述的方法,其特征在于:

8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:

9.根据权利要求3-8中任一所述的方法,其特征在于:

<...

【技术特征摘要】

1.一种寡肽编码核酸倍增的方法或寡肽编码核酸重复串联的pcr方法,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:

3.一种由多个寡肽串联得到复合肽的制备方法,包括如下步骤:

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于:

6.根据权利要求3-...

【专利技术属性】
技术研发人员:甘尚权高蕊徐梦思林留霞罗梦珍周平王立民唐红
申请(专利权)人:广东海洋大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1