一种用于引导编辑的蛋白其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于引导编辑的蛋白其应用，所述蛋白由第一蛋白和第二蛋白融合形成，其中，所述第一蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No. 6、SEQ ID No. 28、SEQ ID No. 30和SEQ ID No. 32所示中的一种；所述第二蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No. 26所示。其中，将具有逆转录酶活性的片段与具有RNase H的片段融合后明显增加了引导编辑大于或等于40bp长片段的编辑效率。进一步地，通过对逆转录酶活性片段进行定点突变，再度明显增加了引导编辑大于或等于40bp长片段的编辑效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及功能基因领域，特别涉及用于引导编辑的功能基因。

技术介绍

1、crispr技术因其易操作、效率高以及普适性等特点，被广泛应用于动植物、人类细胞和微生物等多个方面。随着crispr技术快速发展，人们对于长片段操作的需求日益提升。长片段操作技术主要包括，长片段的删除、插入、替换、倒位、重复等，其在生物合成、品种改良、基因矫正和基因功能研究等多个方面具有重要意义。

2、近年来，引导编辑技术（prime editing, pe）取得重大突破，该技术无需外源供体dna修复模板即可实现靶向插入、缺失及所有12种点突变。然而，常规的引导编辑系统通常可以操作范围小于40bp。虽然可以通过衍生引导编辑系统如dual pe，tj-pe和primeroot等可以进一步实现更长范围的操作，然而目前引导编辑工具在大于或等于40bp的长片段操作方面仍然存在效率偏低和操作范围小等问题。

技术实现思路

1、本专利技术之一提供了一种用于引导编辑的蛋白，所述蛋白由第一蛋白和第二蛋白融合形成，其中，所述第一蛋白的氨基酸序本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种用于引导编辑的蛋白，所述蛋白由第一蛋白和第二蛋白融合形成，其中，所述第一蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No. 6、SEQ ID No. 28、SEQ ID No. 30和SEQ ID No. 32所示中的一种；所述第二蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No. 26所示。

2.编码如权利要求1所述的蛋白的核酸。

3. 根据权利要求2所述的核酸，其特征在于，所述核酸由第一核酸和第二核酸融合形成的核酸；所述第一核酸的碱基序列如SEQ ID No. 16、SEQ ID No. 27、SEQ ID No. 29和SEQ ID No. 31所示中的一种；所述第二核酸...

【技术特征摘要】

1. 一种用于引导编辑的蛋白，所述蛋白由第一蛋白和第二蛋白融合形成，其中，所述第一蛋白的氨基酸序列如seq id no. 6、seq id no. 28、seq id no. 30和seq id no. 32所示中的一种；所述第二蛋白的氨基酸序列如seq id no. 26所示。

2.编码如权利要求1所述的蛋白的核酸。

3. 根据权利要求2所述的核酸，其特征在于，所述核酸由第一核酸和第二核酸融合形成的核酸；所述第一核酸的碱基序列如seq id no. 16、seq id no. 27、seq id no. 29和seq id no. 31所示中的一种；所述第二核酸的碱基序列如seq id no. 25所示。

4.一种引导编辑系统，其包括第i调节元件和第ii调节元件；其中，

5.根据权利要求4所述的引导编辑系统，其特征在于，所述改造后的切口酶自n端到c端构成如下：第一核定位信号、spcas9、第一连接肽、第二核定位信号、第二连接肽、如权利要求1所述的蛋白、第三核定位信号和第四核定位信号。

6. 根据权利要求5所述的引导编辑系统，其特征在于，所述第一核定位信号的氨基酸序列如seq id no. 1所示；所述spcas9的氨基酸序列如seq id no. 2所示；所述第一连接肽的氨基酸序列如seq id no. 3所示；所述第二核定位信号的氨基酸序列如seq id no. 4所示；所述第二连接肽的氨基酸序列如se...

【专利技术属性】
技术研发人员：周焕斌，张素杰，任斌，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：