脑源性Tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒及使用方法技术

技术编号:45549859 阅读:14 留言:0更新日期:2025-06-17 18:22
本发明专利技术公开了脑源性Tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒及使用方法,本发明专利技术的试剂盒由捕获抗体包被的BD‑Tau磁珠试剂、BD‑Tau校准品、BD‑Tau质控品、生物素化的检测抗体的BD‑Tau Detector试剂、BD‑Tau SBG试剂、RGP试剂和BD‑Tau样本稀释液组成,其中,BD‑Tau磁珠试剂的磁珠浓度为0.04mg/mL~0.08mg/mL的羧基磁珠,羧基磁珠包被有Tau J5.H3包被抗体,生物素化的检测抗体的BD‑Tau Detector试剂中检测抗体为Tau12,检测抗体浓度为0.3μg/mL~0.8μg/mL,BD‑Tau SBG试剂中SBG的浓度为40pM~60pM;本发明专利技术的试剂盒可以采用一步法、二步法或三步法中的任意一种方式使用,以检测血浆样本中BD‑Tau蛋白的含量,检测限0.050pg/mL,检测范围为0.050pg/mL~150pg/mL;本发明专利技术提高了对阿尔茨海默病的判定的特异性、准确性和可靠性,解决了阿尔茨海默病的早诊、早筛问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫检测,涉及脑源性tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒及使用方法。


技术介绍

1、阿尔茨海默病是一种神经退行性疾病,常用的检测方法有量表检查、pet-ct检查和脑脊液检查,具有主观性强、价格昂贵,有创检查和患者依从度低等缺点,血浆检查可以有效避免这些弊端。但是,因为血脑屏障的存在,这些生物标志物在血浆中的浓度会更低,个别项目甚至达fg/ml级别,这就导致酶联免疫法、化学发光法等传统的检测方法无法检测到。所以,针对阿尔茨海默病相关标志物的诊断试剂盒的研究,成为免疫检验领域中的热点问题之一。

2、目前,已经发现多种tau蛋白(以tau表示)和多种磷酸化tau蛋白(以ptau表示)均与阿尔茨海默病有显著的相关性的生物标志物,针对ptau和tau检测的试剂盒研究较多,但是无论tau还是ptau的来源均不仅局限于脑部,还可能来源于如心脏、肌肉等外周组织,而且tau或ptau的种类多样,常见的就有ptau-231、ptau-212、ptau-205等多种亚型,对大脑和外周组织中形成的tau无法有效区分,这就降低了对阿尔茨海默病判定的特异性本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.脑源性Tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒由捕获抗体包被的BD-Tau磁珠试剂、BD-Tau校准品、BD-Tau质控品、生物素化的检测抗体的BD-TauDetector试剂、BD-Tau SBG试剂、RGP试剂和BD-Tau样本稀释液组成;所述的BD-Tau磁珠试剂的磁珠为浓度0.04mg/mL~0.08mg/mL的羧基磁珠,羧基磁珠包被有Tau J5.H3包被抗体;所述的生物素化的检测抗体的BD-Tau Detector试剂中检测抗体为Tau12,检测抗体浓度为0.3μg/mL~0.8μg/mL;所述的BD-Tau SBG试剂中SBG的浓度为40pM~6...

【技术特征摘要】

1.脑源性tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒由捕获抗体包被的bd-tau磁珠试剂、bd-tau校准品、bd-tau质控品、生物素化的检测抗体的bd-taudetector试剂、bd-tau sbg试剂、rgp试剂和bd-tau样本稀释液组成;所述的bd-tau磁珠试剂的磁珠为浓度0.04mg/ml~0.08mg/ml的羧基磁珠,羧基磁珠包被有tau j5.h3包被抗体;所述的生物素化的检测抗体的bd-tau detector试剂中检测抗体为tau12,检测抗体浓度为0.3μg/ml~0.8μg/ml;所述的bd-tau sbg试剂中sbg的浓度为40pm~60pm。

2.根据权利要求1所述的脑源性tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒,其特征在于,所述的bd-tau样本稀释液的制备方法为:将7.0g~9.0g三羟基氨基甲烷、1.0g~1.6g三羟基氨基甲烷盐酸盐缓冲盐、6.0g~9.0g的氯化钠、10ml~20ml的非离子型表面活性剂、25ml~35ml阻断剂和0.5ml~1.5ml的防腐剂,加入到1500ml的纯化水中,ph为8.8~9.3,再加入2.0g~3.0g牛血清白蛋白,搅拌,滤膜过滤;所述的阻断剂为hbr-h1阻断剂;

3.根据权利要求1所述的脑源性tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒,其特征在于,所述的羧基磁珠的直径为2.4μm~3.0μm,使用edc溶液活化清洗后的磁珠20min~40min;在bd-tau磁珠试剂的制备过程中,包被抗体tau j5.h3在使用前需要进行换液纯化处理,并使用pbs缓冲液稀释至浓度为0.1mg/ml~0.3mg/ml得到已稀释的包被抗体;包被反应在mes缓冲液中进行,包被反应的具体过程为将活化好的磁珠加入至mes缓冲液,涡旋混匀50s~80s,去掉磁珠上清液,再加入mes缓冲液,涡旋混匀50s~80s,超声处理8s~15s,加入已稀释的包被抗体,涡旋处理50s~80s,滚轴混匀器混合反应1小时~3小时,利用牛血清蛋白对完成包被的磁珠进行封闭,加入磁珠保存液,制备得到bd-tau磁珠试剂。

4.根据权利要求3所述的脑源性tau蛋白单分子荧光免疫技术检测试剂盒,其特征在于,所述的磁珠保存液的制备方法为:将2.5g~3.5g三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、0.6g~1.0g三羟基氨基甲烷、1g~2g氯化钠、8ml~12ml的edta溶液、0.3ml...

【专利技术属性】
技术研发人员:董增军刘伟兰杨浩亮王肖燕钱景琪李成
申请(专利权)人:优抵生物技术石家庄有限公司
类型:发明
国别省市:

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