一种用于抗衰老的干细胞外泌体的培养方法及其应用技术

本发明专利技术属于生物医药或保健品领域，具体公开了一种用于抗衰老的干细胞外泌体培养方法及其应用。所述方法通过低氧（5%‑8% O₂）预培养联合旋转式三维动态培养，显著提升外泌体产量至2.1×10<supgt;11</supgt; particles/mL；分阶段添加TGF‑β1、IFN‑γ及NMN，协同激活免疫调节通路，使TGF‑β1含量达8.5 ng/μg。外泌体与活性成分（维生素C乙基醚、Q10、虾青素）共同包埋于脂质体（HSPC:胆固醇=7:3）中，口服后胃液稳定性达92.3%，肠道吸收率提升至80%。实验表明，该组合物可提高老年小鼠脾脏Treg比例35%，降低IL‑6水平48%，并改善皮肤屏障功能（TEWL降低40%）。长期毒性实验证实其安全性（ALT无异常）。本发明专利技术在抗衰老领域具有显著的技术进步和临床应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药或保健品领域，具体公开了一种用于抗衰老的干细胞外泌体的培养方法及其应用。

技术介绍

1、近年来，干细胞外泌体因其携带mirna、细胞因子等活性分子的特性，在免疫调节领域备受关注。研究发现间充质干细胞（mscs）来源的外泌体可通过调控t细胞亚群分化（如促进调节性t细胞treg增殖、抑制cd8+ t细胞活化）改善免疫衰老（immunosenescence）。例如，过表达吲哚胺2,3双加氧酶（ido）的骨髓mscs外泌体可显著降低促炎因子il-2、ifn-γ水平，同时上调免疫抑制因子il-10和tgf-β，从而延长心脏移植存活时间。此外，三维培养的人脐带mscs外泌体通过递送mir-132-3p和mir-125b-5p，激活treg细胞介导的免疫抑制，被证实可缓解白癜风进展。

2、然而，现有技术在外泌体免疫调节应用上仍存在以下瓶颈：

3、靶向性与稳定性不足：多数研究采用静脉注射或局部给药（如cn116251126b专利中牙周膜干细胞外泌体用于糖尿病牙周炎治疗），而口服递送面临胃酸破坏及肠道吸收效率低的问题，现有专利（本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于抗衰老的干细胞外泌体的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，还包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：步骤（a）中的培养基中添加有0.1-0.5mM的抗氧化剂没食子酸丙酯PG。

4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于：步骤（b）中所述细胞因子组合的添加方式为分阶段脉冲式添加，具体为：在第0小时加入TGF-β1，在第24小时加入IFN-γ，并在第48小时补充NMN。

5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于：步骤（c）中所述旋转式生物反应器的内壁涂覆有胶...

【技术特征摘要】

1.一种用于抗衰老的干细胞外泌体的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，还包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：步骤（a）中的培养基中添加有0.1-0.5mm的抗氧化剂没食子酸丙酯pg。

4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于：步骤（b）中所述细胞因子组合的添加方式为分阶段脉冲式添加，具体为：在第0小时加入tgf-β1，在第24小时加入ifn-γ，并在第48小时补充nmn。

5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于：步骤（c）中所述旋转式生物反应器的内壁涂覆有胶原蛋白/透明质酸复合支架，支架孔隙率为80-90%。

6.根据权利要求5所述的培养方法，其特征在于：步骤（d）中所述尺寸排阻色谱的洗脱液为含1%人血清白蛋白hsa的pbs缓冲液，洗脱流...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑宝权，赵玲，郑金昕，孙滨，郑菲，
申请(专利权)人：恢春丹生物科技海南有限公司，
类型：发明
国别省市：