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一种用于端粒长度检测的唾液采集、预处理及细胞分选方法技术

技术编号:45465655 阅读:27 留言:0更新日期:2025-06-06 21:57
本申请涉及分子检测和生物样本处理领域,公开了一种用于端粒长度检测的唾液采集、预处理及细胞分选方法。该方法选择唾液作为样本,包括唾液样本预处理;磁珠分选获得唾液样本中的中性粒细胞,得到的中性粒细胞进行核酸抽提后用于荧光定量端粒长度检测。本申请的方法选择唾液做为端粒检测样本,对人体没有创伤性,有效解决了目前样本采集不合格、运输不当、放置过久导致唾液样本质量不合格,影响后续处理分选、基因组提取,对端粒正确检测造成极大的干扰。另外,对唾液样本的预处理和磁珠分选,达到对目的细胞的收集,减少唾液杂质的干扰,提取获得的基因组DNA完整度高,目的基因组浓度高,有利于后续荧光定量检测,使得检测结果更加准确。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及分子检测和生物样本处理领域,更具体地说,它涉及一种用于端粒长度检测的唾液采集、预处理及细胞分选方法


技术介绍

1、目前检测端粒长度的方法主要为定量pcr法,常用的检测样本类型有静脉血、指尖血和口腔细胞。当用全血中的白细胞提取dna进行检测端粒长度时,端粒长度显示出可预测的随年龄增长而下降的趋势。但静脉穿刺是一种相对侵入性、昂贵且劳动密集型的样本收集手段,对受检测者有一定的创伤性。而指尖血取样同样具有侵害性,且得到的dna的量不足。而口腔细胞主要由口腔上皮细胞构成,不具有样本整体端粒长度代表性,另外与白细胞端粒长度不同,口腔上皮细胞的端粒长度没有显示出随年龄增长而下降的趋势。因此,在以口腔细胞为主的样本和主要由白细胞组成的样本中测得的端粒长度之间是没有相关性的。唾液样本感染风险低并且易于在非临床环境中收集,唾液样本中的细胞主要有两种,分别是口腔细胞和白细胞,口腔中存在很多细菌,而口腔中的白细胞的主要起到杀灭病原微生物的作用,其中中性粒细胞主要对炎症反应起作用,口腔中的中性粒细胞和血液中的中性粒细胞来源一致,所以在本研究中,选择中性粒细胞作为分选的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种端粒长度检测方法,其特征在于,所述方法选择唾液作为样本,并包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1的过程为:采集唾液样本,用保存液稀释唾液样本后,用细胞筛过滤处理,收集含有白细胞的滤液。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤1中,细胞保存液稀释唾液样本的倍数为1:(1-3)。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述步骤1中,细胞保存液稀释唾液样本的倍数为1:2。

5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤1中,所述步骤1中,所述保存液为生理盐水、PBS、细胞保存液中的任意一种...

【技术特征摘要】

1.一种端粒长度检测方法,其特征在于,所述方法选择唾液作为样本,并包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1的过程为:采集唾液样本,用保存液稀释唾液样本后,用细胞筛过滤处理,收集含有白细胞的滤液。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤1中,细胞保存液稀释唾液样本的倍数为1:(1-3)。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述步骤1中,细胞保存液稀释唾液样本的倍数为1:2。

5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤1中,所述步骤1中,所述保存液为生理盐水、pbs、细胞保存液中的任意一种。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤1中,所述步骤1中,所述保存液为细胞保存液。

【专利技术属性】
技术研发人员:唐雨欣李凯时景景陈烨周宇荀肖君华
申请(专利权)人:东华大学
类型:发明
国别省市:

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