一种阿尔兹海默症标志物Aβ1-42、Aβ1-40、P-Tau181单分子联检方法技术

本发明专利技术公开一种阿尔兹海默症标志物Aβ1‑42、Aβ1‑40、P‑Tau181单分子联检方法，步骤为：一、将微球活化后通过与抗体偶联来制备荧光微球标记抗体，荧光微球标记抗体包括标记Aβ1‑42检测抗体的微球、标记Aβ1‑40检测抗体的微球、标记P‑Tau181检测抗体的微球；二、制备包被抗体固相化板材，其包被有Aβ1‑42，Aβ1‑40，P‑Tau181捕获抗体；三、将含有Aβ1‑42、Aβ1‑40、P‑Tau的样本、质控品或校准品加入到包被抗体固相化的板材后，将荧光微球标记抗体也加入到板材中，利用数字荧光免疫分析仪检测，通过分析荧光颗粒数量并配合标准曲线来量化Aβ1‑42、Aβ1‑40、P‑Tau的含量。本发明专利技术采用数字荧光免疫吸附技术，Aβ1‑42，Aβ1‑40，P‑Tau181三项标志物联合检测对AD的早期诊断、疾病的危险分层，及时给予患者对症治疗以及预后的判断具有重要的临床价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种阿尔兹海默症标志物aβ1-42、aβ1-40、p-tau181单分子联检方法。

技术介绍

1、阿尔兹海默病(alzheimer disease，ad)作为一种常见的痴呆症，又被称为神经退行性疾病或神经变性疾病，目前临床所用的诊断方法包括临床评估、神经心理学测试、以及影像学检查(如磁共振成像、正电子发射断层扫描)等。但上述方法存在一定的主观性和局限性，无法提供足够的准确性和早期诊断的灵敏度。

2、针对阿尔兹海默症患者，临床常用的生物学检测标志物包括β淀粉样蛋白(amyloid-β，aβ40，amyloid-β，aβ)、磷酸化tau蛋白(phosphorylated tau，p-tau)等。aβ是由app经β-和γ-分泌酶的蛋白水解作用而产生的含有39～43个氨基酸的多肽，主要是aβ1-40、aβ1-42。它可以由多种细胞产生，循环于血液、脑脊液和脑间质中，大多与伴侣蛋白分子结合，少数以游离状态存在。aβ淀粉样级联假说认为在大脑中，aβ的产生和清除之间的失衡是引发阿尔茨海默症的主要原因，aβ寡聚体会直接抑制海马长期增本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种阿尔兹海默症标志物Aβ1-42、Aβ1-40、P-Tau181单分子联检方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种阿尔兹海默症标志物Aβ1-42、Aβ1-40、P-Tau181单分子联检方法，其特征在于：步骤一的具体方法为：

3.根据权利要求2所述的一种阿尔兹海默症标志物Aβ1-42、Aβ1-40、P-Tau181单分子联检方法，其特征在于：偶联缓冲液包括10mM pH为6.2±0.05的MES以及0.05％的ProClin300；

4.根据权利要求2所述的一种阿尔兹海默症标志物Aβ1-42、Aβ1-40、P-Tau181单...

【技术特征摘要】

1.一种阿尔兹海默症标志物aβ1-42、aβ1-40、p-tau181单分子联检方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种阿尔兹海默症标志物aβ1-42、aβ1-40、p-tau181单分子联检方法，其特征在于：步骤一的具体方法为：

3.根据权利要求2所述的一种阿尔兹海默症标志物aβ1-42、aβ1-40、p-tau181单分子联检方法，其特征在于：偶联缓冲液包括10mm ph为6.2±0.05的mes以及0.05％的proclin300；

4.根据权利要求2所述的一种阿尔兹海默症标志物aβ1-42、aβ1-40、p-tau181单分子联检方法，其特征在于：步骤二中所述板材为检测板，检测板进行抗体包被的步骤为：分别按照aβ1-42、aβ1-40、p-tau181捕获抗体浓度0.1-0.5ug/t进行包被，在2-8℃下静止包被16±1h，用洗涤液进行清洗若干次，拍干后加入150ul/孔封闭液，37℃封闭2h后，用洗涤液进行清洗若干次，拍干后放入干燥剂，锡箔袋封闭后待用。

5.根据权利要求4所述的一种阿尔兹海默症标志物aβ1-42、aβ1-40、p-tau181单分子联检方法，其特征在于：所述包被液包括0.1m碳酸钠和碳酸氢钠；

6.根据权利要求2所述的一种阿尔兹海默症...

【专利技术属性】
技术研发人员：王海龙，何小波，
申请(专利权)人：河南省科学院物理研究所，
类型：发明
国别省市：