一种用于生产羟基四氢嘧啶的重组盐单胞菌及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种用于生产羟基四氢嘧啶的重组盐单胞菌及其制备方法与应用。本发明专利技术公开的重组盐单胞菌不含有四氢嘧啶水解酶(ectoinehydrolase,DoeA)基因，并能表达四氢嘧啶羟化酶与谷氨酸脱氢酶。实验证明，本发明专利技术的重组盐单胞菌在盐浓度降低至1.4M时发酵，可以生产1.02g/L羟基四氢嘧啶，与野生型盐单胞菌在1.4M盐浓度下羟基四氢嘧啶的产量相比提高了10倍。本发明专利技术的重组盐单胞菌成功实现在降低盐浓度下生产羟基四氢嘧啶，成功构建了在中盐条件下高效生产羟基四氢嘧啶的底盘菌，为进一步降低生产羟基四氢嘧啶的盐浓度提供理论指导，同时也为提高生物合成高附加值化学品羟基四氢嘧啶提供实验依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物中，一种用于生产羟基四氢嘧啶的重组盐单胞菌及其制备方法与应用。

技术介绍

1、羟基四氢嘧啶(1,4,5,6-四氢-2-甲基-5-羟基-4-嘧啶羧酸，hydroxyectoine)是一类杂环氨基酸，其分子式为c6h10n2o3，结构式如式ⅰ，相对分子质量158.16，cas：165542-15-4，它与四氢嘧啶的化学性质几乎相同，但是羟基(-oh)赋予了其额外的保护特性。它具有稳定蛋白质和dna、保护细胞和组织活性、促进体内蛋白折叠等重要作用，使细胞获得抵抗高渗、高温或干燥等极端环境压力的能力。因此被广泛应用于生物医药、生物技术及化妆品等领域中。

2、

3、盐单胞菌(halomonassalifodinae)是嗜盐微生物的重要代表菌群之一，具有可扩展性的高细胞密度，基因组携带ectabc/d簇，是高效生产羟基四氢嘧啶的宿主。传统盐单胞菌发酵过程中，高盐条件能够显著提升羟基四氢嘧啶的生物合成效率，但是存在发酵罐腐蚀及高盐废水处理等问题，因此降低盐浓度对大批量发酵具有积极作用。然而，在低盐条件下羟基四氢嘧啶产量低，其生物本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.重组盐单胞菌，包括下述特征：

2.根据权利要求1所述的重组盐单胞菌，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的重组盐单胞菌，其特征在于：所述重组盐单胞菌还包括下述特征：

4.根据权利要求3所述的重组盐单胞菌，其特征在于：

5.根据权利要求4所述的重组盐单胞菌，其特征在于：所述表达盒中启动子为pJ23119启动子，所述pJ23119启动子为c1)或c2)或c3)：

6.制备重组盐单胞菌的方法，包括：

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：M2)通过利用权利要求2中所述pUP119启动子驱动四氢嘧啶羟化酶基因的表...

【技术特征摘要】

1.重组盐单胞菌，包括下述特征：

2.根据权利要求1所述的重组盐单胞菌，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的重组盐单胞菌，其特征在于：所述重组盐单胞菌还包括下述特征：

4.根据权利要求3所述的重组盐单胞菌，其特征在于：

5.根据权利要求4所述的重组盐单胞菌，其特征在于：所述表达盒中启动子为pj23119启动子，所述pj23119启动子为c1)或c2)或c3)：

6.制备重组盐单胞菌的方法，包括：

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：m2)通过利用权利要求2中所述pup119启动子驱动...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑艳宁，杨婗萍，姜明月，刘孟双，王喆一，刘缨，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：