核酸扩增试剂盒和核酸检测方法技术

本申请涉及一种核酸扩增试剂盒和核酸检测方法，核酸扩增试剂盒包括核酸提取试剂，核酸提取试剂包括以下组分：Tris‑HCl、NaCl、三亚乙基四胺、二硫苏糖醇和表面活性剂；其中，Tris‑HCl的工作浓度为0.05～0.2mol/L；NaCl的工作浓度为120～140mM；三亚乙基四胺的工作浓度为80～110mM；二硫苏糖醇的工作浓度为3～6mM；表面活性剂的体积分数为0.1％～0.5％。本申请的核酸扩增试剂盒，使得生物样本中的细胞可快速裂解并释放高浓度的核酸，释放的核酸能够保持一定的稳定性，并且浓度满足后续直扩步骤的要求；同时三亚乙基四胺可以快速结合细胞中的蛋白杂质，使其不会抑制DNA聚合酶的活性。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及核酸提取，具体而言，涉及一种核酸提取试剂、核酸检测试剂盒和方法。

技术介绍

1、长片段基因组dna分子的制备在生物学领域，特别是dna测序和基因组组装中有着广泛的需求。smrt长读长测序技术对于单分子测序长度可达60-100kb，而纳米孔测序技术则可检测长达mb级别的单分子dna片段。测序技术和光学图谱等技术的发展，对简单快速地提取长片段基因组dna分子有了更高的需求。然而，长片段基因组dna提取时存在耗时长、操作复杂且易分解的问题。

2、如何提取长片段基因组dna是核酸制备的难点。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，实现长片段基因组dna直扩，本申请的第一目的在于提供一种核酸扩增试剂盒，包括核酸提取试剂，核酸提取试剂包括以下组分：tris-hcl、nacl、三亚乙基四胺、二硫苏糖醇和表面活性剂；其中，tris-hcl的工作浓度为0.05～0.2mol/l；nacl的工作浓度为120～140mm；三亚乙基四胺的工作浓度为80～110mm；二硫苏糖醇的工作浓度为3～6mm；表面活性剂的体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.核酸扩增试剂盒，其特征在于，包括核酸提取试剂，所述核酸提取试剂包括以下组分：Tris-HCl、NaCl、三亚乙基四胺、二硫苏糖醇和表面活性剂；其中，Tris-HCl的工作浓度为0.05～0.2mol/L；所述NaCl的工作浓度为120～140mM；所述三亚乙基四胺的工作浓度为80～110mM；所述二硫苏糖醇的工作浓度为3～6mM；所述表面活性剂的体积分数为0.1％～0.5％。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，核酸提取试剂满足以下条件(1)～(2)中的至少一种：

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括长片段核酸扩增试剂，所述...

【技术特征摘要】

1.核酸扩增试剂盒，其特征在于，包括核酸提取试剂，所述核酸提取试剂包括以下组分：tris-hcl、nacl、三亚乙基四胺、二硫苏糖醇和表面活性剂；其中，tris-hcl的工作浓度为0.05～0.2mol/l；所述nacl的工作浓度为120～140mm；所述三亚乙基四胺的工作浓度为80～110mm；所述二硫苏糖醇的工作浓度为3～6mm；所述表面活性剂的体积分数为0.1％～0.5％。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，核酸提取试剂满足以下条件(1)～(2)中的至少一种：

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括长片段核酸扩增试剂，所述长片段核酸扩增试剂包括长片段核酸扩增引物组。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述长片段核酸扩增引物组包括hba2引物对、α3.7引物对、α4....

【专利技术属性】
技术研发人员：杨梦婷，贾延凯，杨超，
申请(专利权)人：深圳明悦医学检验实验室，
类型：发明
国别省市：