基于CRISPR-Cas13a检测PEDV的电化学生物传感系统及其应用技术方案

本发明专利技术公开了一种基于CRISPR‑Cas13a检测PEDV的电化学生物传感系统，包括电化学生物传感器和CRISPR‑Cas13a体系；所述的电化学生物传感器包括工作电极，工作电极表面修饰有还原氧化石墨烯‑聚吡咯‑金纳米粒子复合材料层和MB‑RNA探针；MB‑RNA探针一端修饰有巯基另一端修饰有信号分子，MB‑RNA探针通过Au‑S键与还原氧化石墨烯‑聚吡咯‑金纳米粒子复合材料层连接；CRISPR‑Cas13a体系包括权利要求1所述的crRNA组和Cas13a。本发明专利技术的电化学生物传感系统对PEDV病毒具有极高的临床敏感性和临床特异性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学，尤其涉及一种基于crispr-cas13a检测pedv的电化学生物传感系统及其应用。

技术介绍

1、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，pedv)属于冠状病毒科冠状病毒属的包膜单链rna病毒，其基因长度约为28kb，在猪小肠绒毛上皮细胞内复制，引起肠道疾病，引发猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，ped)，临床表现为哺乳仔猪腹泻、呕吐、脱水，致死率高。乳仔猪发病率为80-100％，死亡率为50-90％，对养猪业和全球粮食安全构成严重威胁。

2、目前，通常采用病毒分离、电子显微镜、免疫荧光(ifa)、环介导等温扩增(lamp)、抗原酶联免疫吸附试验(elisa)、逆转录聚合酶链反应(rt-pcr)、定量pcr(qpcr)和高通量测序等方法来检测猪是否感染pedv，这些技术工作量较大且耗时，存在假阳性，依赖于专业的技术人员和实验室平台，需要昂贵的仪器，不适合现场及时、快速的检测。

3、因此，迫切需要建立一种快速、准确、便捷、成本低廉、高本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测PEDV的CRISPR-Cas13a的crRNA组，其特征在于，包括PEDV-crRNA 3、PEDV-crRNA4和PEDV-crRNA9中的至少一种；

2.一种基于CRISPR-Cas13a检测PEDV的电化学生物传感系统，其特征在于，包括电化学生物传感器和CRISPR-Cas13a体系；

3.根据权利要求2所述的基于CRISPR-Cas13a检测PEDV的电化学生物传感系统，其特征在于，所述的Cas13a为LwaCas13a。

4.根据权利要求2所述的基于CRISPR-Cas13a检测PEDV的电化学生物传感系统，其特征在于，所述...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测pedv的crispr-cas13a的crrna组，其特征在于，包括pedv-crrna 3、pedv-crrna4和pedv-crrna9中的至少一种；

2.一种基于crispr-cas13a检测pedv的电化学生物传感系统，其特征在于，包括电化学生物传感器和crispr-cas13a体系；

3.根据权利要求2所述的基于crispr-cas13a检测pedv的电化学生物传感系统，其特征在于，所述的cas13a为lwacas13a。

4.根据权利要求2所述的基于crispr-cas13a检测pedv的电化学生物传感系统，其特征在于，所述的mb-rna探针的核苷酸序列如seq id no.40所示。

5.根据权利要求2所述的基于crispr-c...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄俊，李业，张徐俞，周赵凡，闻东亚，张坤田，俞晓平，张明洲，叶子弘，
申请(专利权)人：浙江科技大学，
类型：发明
国别省市：