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卤虫卵黄蛋白的提取方法及对斑马鱼伤口修复活性的应用技术

技术编号:45120833 阅读:12 留言:0更新日期:2025-04-29 18:59
本发明专利技术公开了卤虫卵黄蛋白的提取方法及对斑马鱼伤口修复活性的应用,属于生物医药领域。本发明专利技术利用稀碱尿素复合溶液破坏卤虫外壳,采用等电沉淀的方法从卤虫体内中提取卵黄蛋白,并通过特异性染色和高分辨质谱技术鉴定该蛋白为一种含磷脂的糖蛋白。进一步的研究通过斑马鱼尾鳍伤口修复模型证实,卤虫卵黄蛋白能够促进斑马鱼组织的损伤修复。这一作用主要通过促进炎症因子的分泌和发挥组织氧化损伤自由基清除功能来实现。本研究不仅揭示了卤虫卵黄蛋白的生物学活性,还拓展了其在水产养殖领域的应用范围。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及卤虫卵黄蛋白的提取方法及对斑马鱼伤口修复活性的应用,属于生物医药领域。


技术介绍

1、卤虫(brine shrimp)也称盐水丰年虫,为甲壳亚门鳃足纲无甲目盐水丰年虫科卤虫属(artemia))水生动物,主要分布在我国西藏和渤海湾地区,是当地重要的生物资源。卤虫一般以休眠卵存活,能抵御外界多种极端环境,且具有较长的存活期。卤虫休眠卵常作为水产养殖领域各类水产生物幼苗开口饵料在水产养殖行业内广泛应用,具有营养价值高、使用方便等优势。

2、卤虫虽然在水产养殖中被广泛利用,但是针对孵化后其作为水生生物食物源提供的营养价值功效成分尚不清楚。由于不同种类的水生生物在不同生理状态下的营养需求不同,有必要全面评估卤虫的功效成分,探明卤虫作为开口饵料的活性成分的含量和种类,进一步扩大卤虫卵在水产领域或新资源蛋白食品领域的应用范畴,以便针对性地制备水生生物所需的饵料成分,同时针对其功能活性成分,充分将当地的卤虫资源进行深入挖掘和合理使用。


技术实现思路

1、技术问题:卤虫对水生生物提供的营养价值功效成分尚不清楚,难以针对性地提供水生生物所需的饵料成分。

2、技术方案:为解决上述问题,本专利技术提供孵化后卤虫卵黄蛋白在斑马鱼组织伤口修复功能性中的应用。

3、本专利技术提供了以卵黄蛋白为主要活性物质的组合物在制备促进伤口修复的产品中的应用。

4、在一种实施方式中,所述卵黄蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

5、在一种实施方式中,所述产品中,所述卵黄蛋白的含量不低于50mg/l或0.1mg/g。

6、在一种实施方式中,所述产品用于水生生物。

7、在一种实施方式中,所述水生生物包括但不限于斑马鱼。

8、在一种实施方式中,所述以卵黄蛋白为主要活性物质的组合物的制备方法为:

9、(1)将孵化后的卤虫溶解在含10-14%w/v氢氧化钠和3%-6%w/v的尿素低共熔溶剂中,进行2-4次冷冻解冻循环,得到样品1;

10、(2)将步骤(1)得到的样品1溶解后,振荡至少2h,离心收集沉淀;

11、(3)将步骤(2)得到的沉淀溶解于氯化钠溶液,振荡后离心收集滤液;

12、(4)将步骤(3)所述滤液的ph调节至3.9-4.7,得到卵黄粗蛋白;

13、(5)将步骤(4)所述卵黄粗蛋白进行透析、干燥,得到卵黄蛋白。

14、在一种实施方式中,所述产品包括饲料或药品,所述药品还含有常规载体和/或辅料。

15、在一种实施方式中,所述常规载体包含微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。

16、在一种实施方式中,所述辅料包含赋形剂和/或附加剂。

17、在一种实施方式中,所述药品的剂型包括粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。

18、本专利技术还提供了卵黄蛋白在制备具有抗氧化功能的产品中的应用,所述卵黄蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

19、在一种实施方式中,所述产品包括饲料、药品或保健品。

20、在一种实施方式中,所述抗氧化功能包括以下至少一种:

21、(1)提高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活力;

22、(2)降低丙二醛的活力。

23、有益效果:

24、本专利技术从卤虫卵中提取出卵黄蛋白,通过体内实验证实,所述卵黄蛋白有利于斑马鱼的组织伤口修复,并提高了斑马鱼的抗氧化功能。

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【技术保护点】

1.以卵黄蛋白为主要活性成分的组合物在制备促进伤口修复的产品中的应用,其特征在于,所述卵黄蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述应用,其特征在于,所述产品中,所述卵黄蛋白的含量不低于50mg/L或0.1mg/g。

3.如权利要求2所述应用,其特征在于,所述产品应用于水生生物,所述水生生物包括但不限于斑马鱼。

4.如权利要求3所述应用,其特征在于,所述组合物的制备方法为:

5.如权利要求4所述应用,其特征在于,所述产品包括饲料或药品;所述药品还含有常规载体和/或辅料。

6.如权利要求5所述应用,其特征在于,所述常规载体包含微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。

7.如权利要求6所述应用,其特征在于,所述药品的剂型包括粉剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。

8.卵黄蛋白在制备具有抗氧化功能的产品中的应用,其特征在于,所述卵黄蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

9.如权利要求8所述产品,其特征在于,所述产品包括饲料、药品或保健品。

10.如权利要求9所述应用,其特征在于,所述抗氧化功能包括以下至少一种:

...

【技术特征摘要】

1.以卵黄蛋白为主要活性成分的组合物在制备促进伤口修复的产品中的应用,其特征在于,所述卵黄蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.如权利要求1所述应用,其特征在于,所述产品中,所述卵黄蛋白的含量不低于50mg/l或0.1mg/g。

3.如权利要求2所述应用,其特征在于,所述产品应用于水生生物,所述水生生物包括但不限于斑马鱼。

4.如权利要求3所述应用,其特征在于,所述组合物的制备方法为:

5.如权利要求4所述应用,其特征在于,所述产品包括饲料或药品;所述药品还含有常...

【专利技术属性】
技术研发人员:冯建慧曹文浩许波李群英王鹏飞王振华
申请(专利权)人:烟台大学
类型:发明
国别省市:

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