一种高分辨率DNA拓扑异构分析方法技术

本发明专利技术提供了一种高分辨率DNA拓扑异构分析方法，具体属于基因检测技术领域。本发明专利技术所述高分辨率DNA拓扑异构分析方法包括以下步骤：提取DNA，检测DNA浓度；制备琼脂糖凝胶；以相同的总量将DNA上样到琼脂糖凝胶胶孔中；设置电压强度、电泳时间和环境温度后，进行琼脂糖凝胶电泳；电泳后，切胶，进行转膜；转膜后，取出尼龙膜进行放射杂交，扫描成像，分析并解读DNA拓扑异构信息。本发明专利技术所述方法能够实现高分辨率的DNA拓扑结构分析，可广泛应用与细胞生物学、分子生物学、病理学、免疫学和内分泌学等领域，对遗传疾病诊断、基因治疗、DNA图谱分析、检测样品中的DNA及其含量、PCR产物分析等领域的发展具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因检测，具体涉及一种高分辨率dna拓扑异构分析方法。

技术介绍

1、dna的超螺旋拓扑结构检测广泛应用在遗传疾病诊断、dna图谱分析、pcr产物分析、基因拷贝数变化检测、突变检测、连锁分析、基因遗传多样性分析、基因重排和结构变异检测、病毒dna检测、基因组特定区域的特性分析等领域。dna拓扑异构分析主要包括制胶；电泳；转膜(即将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素膜或尼龙膜)上，即印迹)；分子杂交(即将上一步固定于膜上的核酸与同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下杂交)；显影等过程。每一步都需要精细化处理，任何一步操作出现问题，都会导致结果不理想，不能获得高分辨率的结果图，如出现很多非特异性条带，条带分辨率较低，条带变形，条带模糊，出现杂质，背景太暗、太浅等，这些均会导致最终的图像质量较差。因此获得清晰可见的条带对dna图谱分析，检测样品中的dna及其含量，pcr产物分析等领域的发展具有重要意义。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种高分辨率dna拓本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高分辨率DNA拓扑异构分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的高分辨率DNA拓扑异构分析方法，其特征在于，DNA浓度使用Nanodrop仪器和Qubit4仪器进行双检测。

3.根据权利要求1所述的高分辨率DNA拓扑异构分析方法，其特征在于，所述电压强度为50V；所述电泳时间为48h；所述环境温度为4℃。

4.根据权利要求1所述的高分辨率DNA拓扑异构分析方法，其特征在于，所述切胶的位置包括：从距离观察到的基因组DNA条带下方1.5cm处进行切胶，直至切出10cm的长度。

5.根据权利要求1所述的高分辨率DNA拓...

【技术特征摘要】

1.一种高分辨率dna拓扑异构分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的高分辨率dna拓扑异构分析方法，其特征在于，dna浓度使用nanodrop仪器和qubit4仪器进行双检测。

3.根据权利要求1所述的高分辨率dna拓扑异构分析方法，其特征在于，所述电压强度为50v；所述电泳时间为48h；所述环境温度为4℃。

4.根据权利要求1所述的高分辨率dna拓扑异构分析方法，其特征在于，所述切胶的位置包括：从距离观察到的基因组dna条带下方1.5cm处进行切胶，直至切出10cm的长度。

5.根据权利要求1所述的高分辨率dna拓扑异构分析方法，其特征在于，吸水纸的每个边长比胶块每个边长长0.5～1cm；吸水纸的数量为70～80张。

6.根据权利要求1所述的高分辨率d...

【专利技术属性】
技术研发人员：张霞，霍金龙，霍海龙，
申请(专利权)人：吕梁学院，
类型：发明
国别省市：