【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及一种防治美国白蛾的抗菌肽hcattacin1基因dsrna及其应用。
技术介绍
1、美国白蛾hyphantria cunea(drury)(lepidoptera:erebidae)原产于北美洲，目前在30多个国家被发现，是世界范围内重要的森林害虫(ge et al.2019)。美国白蛾以幼虫态进行为害，1-2龄时群居在植物树叶背面啃食叶肉，只残留叶脉，同时在取食过程中会吐很多丝将自己包裹，起到保护作用；3龄幼虫取食能力增强，能将叶片咬透成孔洞状；长至4龄，其活动能力增强，开始分散成小群体取食叶片；5龄进入暴食期，将树木叶片吃到只剩下主脉和叶柄；6-7龄幼虫将整片叶子除主柄外全部吃光(王玮2020；刘晓霞2020)。美国白蛾有600多种寄主植物，包括各种乔、果树、灌木、草本植物和农作物(edosa et al.2019)。由于美国白蛾具有寄主植物复杂、摄食量大、繁殖和传播能力强等特点，其入侵严重影响了中国的生态环境、景观、农业、林业等诸多方面，给中国造成了巨大损失(赵铁珍2005)。化学防治是防治美国白蛾的重要手段，化学防治见效快、效果显著，在受灾面积大、发生量大、破坏严重的情况下，能收到立竿见影的防治效果，但长期大量的使用化学杀虫剂带来了诸多不利影响。因此，发掘新的生物防治方法、探索新的美国白蛾防治策略势在必行。
2、rna干扰(rnainterference,rnai)是指在真核生物中由双链rna(double-stranded rna,dsrna)诱发同源mrna高效特异性降解，从而
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供美国白蛾hcattacin1基因的dsrna在美国白蛾防治中的应用。其中，美国白蛾hcattacin1基因由申请人首次克隆获得，基于该基因设计dsrna并导入到美国白蛾体内，可以有效防治美国白蛾。
2、具体地，本专利技术提出了一种防治美国白蛾的抗菌肽hcattacin1基因的dsrna，所述hcattacin1基因的核苷酸序列如seq id no：1所示；所述dsrna以美国白蛾的hcattacin1质粒作为模板，以上游引物dshcattacin1f和下游引物dshcattacin1r进行pcr扩增，其中，
3、上游引物dshcattacin1f为：
4、下游引物dshcattacin1r为：
5、本专利技术还提供一种以上所述的抗菌肽hcattacin1基因在美国白蛾防治中的应用。
6、本专利技术还提供一种防治美国白蛾的dsrna，所述dsrna为抗菌肽hcattacin1基因的dsrna，所合成的dshcattacin1靶向的核苷酸序列如seq id no：1所示。
7、一种编码以上任一所述的dsrna靶向的dna。
8、一种重组表达载体，其表达以上任一所述的dsrna。
9、一种宿主菌，其转化以上所述的重组表达载体。
10、本专利技术还公开一种防治美国白蛾的方法，用以上任一所述的dsrna联合粘质沙雷氏菌处理美国白蛾。即可以先用dsrna处理美国白蛾后再用粘质沙雷氏菌处理美国白蛾，也可以同时使用dsrna和粘质沙雷氏菌处理美国白蛾。
11、进一步的，所述dsrna浓度为1μg/μl，所述9.5×109cfu/ml粘质沙雷氏菌。
12、进一步的，先用所述dsrna浓度处理美国白蛾48h后，再用粘质沙雷氏菌处理美国白蛾。
13、进一步的，所述处理方法为饲喂粘质沙雷氏菌的菌液。
14、有益效果：
15、本专利技术基于hcattacin1基因设计了dsrna，研究建立了利用注射法进行美国白蛾hcattacin1 rna干扰体系，并得出注射法在美国白蛾中取得了明显的基因沉默效果，为hcattacin1 rnai技术应用提供了理论依据。同时，通过使用ht115菌株构建dsrna表达体系，压缩了干扰成本。本专利技术利用该体系成功干扰了hcattacin1基因的表达，并发现hcattacin1基因沉默的美国白蛾对粘质沙雷氏菌sm1菌株敏感性显著提高。通过实验发现hcattacin1 dsrna与sm1同时使用，美国白蛾的死亡率明显提高，说明其可以提高生防菌的防治效果。这些为hcattacin1 dsrna在美国白蛾防治中的应用提供了理论依据。
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1.一种防治美国白蛾的抗菌肽Hcattacin1基因dsRNA，其特征在于，所述Hcattacin1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述dsRNA以美国白蛾的Hcattacin1质粒作为模板，以上游引物dsHcattacin1F和下游引物dsHcattacin1R进行PCR扩增，其中，
2.如权利要求1所述的抗菌肽Hcattacin1基因在美国白蛾防治中的应用。
3.一种防治美国白蛾的dsRNA，其特征在于，所述dsRNA为抗菌肽Hcattacin1基因的dsRNA，所合成的dsHcattacin1靶向的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
4.一种编码权利要求1-3任一所述的dsRNA靶向的DNA。
5.一种重组表达载体，其特征在于，其表达权利要求1-3任一所述的dsRNA。
6.一种宿主菌，其特征在于，其转化权利要求5所述的重组表达载体。
7.一种防治美国白蛾的方法，其特征在于，用权利要求1-3任一所述的dsRNA联合粘质沙雷氏菌处理美国白蛾。
8.如权利要求7所述的方法，其
9.如权利要求7-8所述的方法，其特征在于，先用所述dsRNA浓度处理美国白蛾48 h后，再用粘质沙雷氏菌处理美国白蛾。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述处理方法为饲喂粘质沙雷氏菌的菌液。
...【技术特征摘要】
1.一种防治美国白蛾的抗菌肽hcattacin1基因dsrna，其特征在于，所述hcattacin1基因的核苷酸序列如seq id no：1所示；所述dsrna以美国白蛾的hcattacin1质粒作为模板，以上游引物dshcattacin1f和下游引物dshcattacin1r进行pcr扩增，其中，
2.如权利要求1所述的抗菌肽hcattacin1基因在美国白蛾防治中的应用。
3.一种防治美国白蛾的dsrna，其特征在于，所述dsrna为抗菌肽hcattacin1基因的dsrna，所合成的dshcattacin1靶向的核苷酸序列如seq id no：1所示。
4.一种编码权利要求1-3任一所述的dsrna靶向的dn...
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