一种NAD激酶突变体、固定化酶及其应用制造技术

本申请属于生物技术领域，具体涉及一种NAD激酶突变体、固定化酶及其应用。本申请提供了一种NAD激酶突变体，该突变体能够高效利用多聚磷酸(poly(P))衍生物代替辅酶ATP作为磷酰基供体，提高NADP的合成效率，减少产物中ATP残留，有利于简化产物分离纯化工艺，降低工业规模制备成本。本申请采用树脂为载体，含所述码基因的工程菌经发酵培养获得的粗酶液为活性组分制备获得NAD激酶编固定化酶，该方法制备的固定化NAD激酶连续使用10个批次仍能达到90%以上的转化率，具有良好的工业应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本申请属于生物，具体涉及一种nad激酶突变体、固定化酶及其应用。

技术介绍

1、酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，nadp）是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，nad）的磷酸化形式，即辅酶ii，是一种含有2'-磷酸核糖片段的天然核苷酸，在生物氧化过程中作为氢传递体，以还原态nadph形式参与脂类，核苷酸以及脂肪酸等合成，是生物体内不可缺少的重要辅酶。

2、酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nadp）的制备方法主要包括化学合成和生物合成等途径。相较于化学合成，采用生物酶法合成nadp的研究显示了显著的优势：酶的催化效率远高于传统无机催化剂，能够在温和条件下（包括常温、常压及接近中性的ph值）高效运作，这不仅减少了能源消耗和设备要求，也降低了对环境的影响。此外，与化学合成和传统微生物发酵相比，酶法合成能够大幅缩短生产周期并降低成本，显示出更高的经济效益和环保性。

3、 nadp的生物酶催化主要在nad激酶的作用下，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种NAD激酶突变体，其特征在于，所述NAD激酶突变体是将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列进行下列突变：

2.一种固定化酶，其特征在于，所述固定化酶以树脂为载体，以权利要求1所述的一种NAD激酶突变体的工程菌的酶液为活性成分。

3.权利要求1所述的一种NAD激酶突变体或权利要求2所述的固定化酶在酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸制备中的应用。

4.一种酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的制备方法，其特征在于，以NAD为底物，以权利要求1所述NAD激酶突变体的工程菌的湿菌体为催化剂，以多聚磷酸poly(P)衍生物为磷酰基供体,在缓冲液反应体系中反应得到酰胺腺嘌呤二核苷...

【技术特征摘要】

1.一种nad激酶突变体，其特征在于，所述nad激酶突变体是将seq id no.1所示的氨基酸序列进行下列突变：

2.一种固定化酶，其特征在于，所述固定化酶以树脂为载体，以权利要求1所述的一种nad激酶突变体的工程菌的酶液为活性成分。

3.权利要求1所述的一种nad激酶突变体或权利要求2所述的固定化酶在酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸制备中的应用。

4.一种酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的制备方法，其特征在于，以nad为底物，以权利要求1所述nad激酶突变体的工程菌的湿菌体为催化剂，以多聚磷酸poly(p)衍生物为磷酰基供体,在缓冲液反应体系中反应得到酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸。

5.根据权利要求4所述的一种酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的制备方法，其特征在于，所述缓冲液的ph值为6～9。

6.根据权利要求4所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹树平，韩梦男，沈其，薛亚平，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：