一种提高基因编辑效率的紫花苜蓿U6启动子及其应用制造技术

本发明专利技术属于基因编辑技术领域，具体涉及一种提高基因编辑效率的紫花苜蓿U6启动子及其应用。所述启动子为SEQ ID NO.2所示序列的MsU6‑3或SEQ ID NO.3所示序列的MsU6‑20或SEQ ID NO.4所示序列的MsU6‑38。本发明专利技术通过生信分析寻找紫花苜蓿花内源U6启动子，然后设计了携带MsU6‑3或MsU6‑20或MsU6‑38的CRISPR/Cas9基因编辑载体，并利用毛状根转化植株和测序技术验证了本发明专利技术提供的启动子MsU6‑3、MsU6‑20和MsU6‑38的基因编辑效率均可达100%，本发明专利技术提供的启动子对未来加快苜蓿的基因功能研究和分子育种技术具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因编辑，具体涉及一种提高基因编辑效率的紫花苜蓿u6启动子及其应用。

技术介绍

1、紫花苜蓿是一种十分重要的同源四倍体饲料作物，在我国畜牧生产上具有重要地位，为全球畜牧养殖业提供优质蛋白质和必需营养元素。当前对苜蓿品种选育主要集中在杂交和选择等传统方法，且育成优良品种的育成速度慢、数量少，难以满足苜蓿市场需求，因此亟需提供新的苜蓿品种改良策略，以获得产量高、品质好、抗逆性强的优良品种。

2、近年来，crispr/cas9基因编辑技术给植物生物学和作物育种带来了革命性变化，由于苜蓿为同源四倍体植物，遗传背景复杂，难以高效地获得纯合突变体，给基因编辑带来巨大挑战，目前大部分报道的有关苜蓿的crispr/cas9基因编辑载体的纯合突变效率较低，制约了苜蓿利用crispr/cas9技术开展基因功能研究和生物育种的进程。

3、u6启动子是一种ⅱ型启动子，它可与真核生物rna聚合酶iii结合，转录u6 rna。u6启动子常用于crispr/cas9基因编辑载体中的grna的转录，是载体中的关键元件。u6启动子具有种属特异性，在基因本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高基因编辑效率的紫花苜蓿U6启动子，其特征在于，所述提高基因编辑效率的紫花苜蓿U6启动子为MsU6-3或MsU6-20或MsU6-38；所述MsU6-3的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；所述MsU6-20的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述MsU6-38的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

2.一种权利要求1所述的提高基因编辑效率的紫花苜蓿U6启动子在提高CRISPR/Cas9系统基因编辑效率中的应用。

3.一种权利要求1所述的提高基因编辑效率的紫花苜蓿U6启动子在苜蓿性状改良中的应用。

4.一种权利要求1所述的提高基因...

【技术特征摘要】

1.一种提高基因编辑效率的紫花苜蓿u6启动子，其特征在于，所述提高基因编辑效率的紫花苜蓿u6启动子为msu6-3或msu6-20或msu6-38；所述msu6-3的核苷酸序列如seq idno.2所示；所述msu6-20的核苷酸序列如seq id no.3所示；所述msu6-38的核苷酸序列如seq id no.4所示。

2.一种权利要求1所述的提高基因编辑效率的紫花苜蓿u6启动子在提高crispr/cas9系统基因编辑效率中的应用。

3.一种权利要求1所述的提高基因编辑效率的紫花苜蓿u6启动子在苜蓿性状改良中的应用。

4.一种权利要求1所述的提高基因编辑效率的紫花苜蓿u6启动子在苜蓿基因功能研究中的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：丛丽丽，郭雨寒，刘相君，伍崇斌，詹惠童，贾世朕，高腾，于爱灵，贾磊，王增裕，柴茂峰，张昆，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：