一种CRISPR-Cas12a传感器及其联合妊娠试纸检测水体中MC-LR的方法技术

本发明专利技术属于水体中微囊藻毒素检测技术领域，具体涉及一种CRISPR‑Cas12a传感器及其联合妊娠试纸检测水体中MC‑LR的方法。本发明专利技术基于CRISPR‑Cas12a传感器开发了一种MC‑LR检测方法，本发明专利技术检测方法是基于CRISPR‑Cas12a传感器反式切割(trans‑cleavage)能力、阳离子表面活性剂与含部分杂交双链的长链的结合能力、阳离子表面活性剂触发HCG释放能力以及HCG与妊娠试剂的结合能力开发得到，可以快速且准确地实现MC‑LR的检测，且不需要专门的检测试纸，使用商用的妊娠试纸即可，成本低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于水体中微囊藻毒素检测，具体涉及一种crispr-cas12a传感器及其联合妊娠试纸检测水体中mc-lr的方法。

技术介绍

1、微囊藻毒素lr(mc-lr)是已知毒性最强的淡水蓝藻毒素之一，具有强烈的肝脏毒性，它能够强烈抑制蛋白磷酸酶的活性，对肝脏细胞造成损害，可能导致肝脏肿大、出血和坏死等病理变化；此外，mc-lr还是强烈的肝脏肿瘤促进剂，长期饮用可能增加患肝癌的风险。除了肝脏毒性外，mc-lr还具有肾脏毒性、生殖毒性、神经毒性和遗传毒性等，对多种器官和系统造成损害。mc-lr广泛分布于富营养化的淡水湖泊、水库和河流等水体，对人体健康和环境均具有较大威胁。因此，对mc-lr的检测尤其重要。

2、现有技术可以通过等离子体氧化石墨烯(p-go)实时组装适体传感器的方法，超灵敏检测微囊藻毒素lr；其主要由两部分组成，一是借助生物素/亲和素组装的mc-lr适配体的集合体，用于识别靶标物；二是连有适配体互补链的空心纳米板agclau和p-go的复合物，可以增强拉曼信号。此外，检测溶液中加入拉曼信号分子以产生sers信号；该方案通过调整mc-本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种CRISPR-Cas12a传感器，其特征在于，包括Cas12a、crRNA、Cas12a激活链和MC-LR适配体；其中，crRNA的序列如SEQ ID NO:1所示；和/或Cas12a激活链如SEQ ID NO:2所示；和/或MC-LR适配体的序列如SEQ ID NO:3所示。

2.水体中MC-LR的检测试剂或检测试剂盒，其特征在于，包括分别独立包装CRISPR-Cas12a传感器、含部分杂交双链的长链、阳离子表面活性剂或其溶液、负载HCG试剂和HCG检测试剂；CRISPR-Cas12a传感器包括Cas12a、crRNA、Cas12a激活链和MC-LR适配体。

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【技术特征摘要】

1.一种crispr-cas12a传感器，其特征在于，包括cas12a、crrna、cas12a激活链和mc-lr适配体；其中，crrna的序列如seq id no:1所示；和/或cas12a激活链如seq id no:2所示；和/或mc-lr适配体的序列如seq id no:3所示。

2.水体中mc-lr的检测试剂或检测试剂盒，其特征在于，包括分别独立包装crispr-cas12a传感器、含部分杂交双链的长链、阳离子表面活性剂或其溶液、负载hcg试剂和hcg检测试剂；crispr-cas12a传感器包括cas12a、crrna、cas12a激活链和mc-lr适配体。

3.根据权利要求2所述的检测试剂或检测试剂盒，其特征在于，检测试剂或检测试剂盒满足以下条件中的一种或多种：

4.根据权利要求3所述的检测试剂或检测试剂盒，其特征在于，含部分杂交双链的长链中，长链和短链的投料摩尔比为1:4。

5.根据权利要求3或4所述的检测试剂或检测试剂盒，其特征在于，负载hcg的碳酸钙球霰石的制备方法包括：将cacl2溶液与hcg溶液混合，超声；然后迅速加入na2co3溶液反应得反应物；将反应物洗涤，乙醇溶解，干燥得负载hcg的碳酸钙球霰石；其中，hcg溶液由tris-...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘丽赏，苏杭，陈晋荣，贺强，张书圣，
申请(专利权)人：临沂大学，
类型：发明
国别省市：