【技术实现步骤摘要】
本申请涉及口腔清洁，特别是涉及一种牙软垢模型及其构建方法和应用。
技术介绍
1、软垢又称白垢(materia alba)，为附着在牙面、修复体表面、牙石和龈缘处的软而粘的沉积物。软垢主要由微生物、脱落的上皮细胞和白细胞、唾液中的粘液素、蛋白质和脂类、以及少量食物碎屑组成，多附在牙颈部，呈白色、浅黄色或浅灰色附着物，肉眼可见，质软而易被刷牙或漱口等方式去除。软垢是导致多种口腔疾病的重要因素之一，例如，软垢中的细菌代谢产生的酸性物质会侵蚀牙釉质，形成龋洞；软垢会刺激牙龈引起炎症，导致牙龈炎、牙周炎等；软垢中细菌代谢产生的硫化物等物质会导致口臭。
2、随着大众对口腔健康的重视和口腔护理行业的发展，市场上出现了大量的口腔护理产品，目前，常规的用于清洁口腔的产品有牙膏、牙刷、牙线、漱口水等，随着科技的发展，也开发出一些口腔电子产品，如电动牙刷、冲牙器等，以提高口腔清洁效果。鉴于软垢对口腔健康的影响，评估口腔护理产品对软垢的清洁作用也非常重要。目前，评估口腔护理产品对软垢的清洁作用主要通过临床试验的方式进行，然而，这种测试方法由于受试者人群的个体差异(包括牙齿护理状况差异以及口腔清洁习惯的区别等)，如果没有足够样本量的志愿者参与，得出的结果很难量化并产生统计意义，上升到产品的测试维度，这种传统方法由于受较大人为因素影响，测试过程缺乏一致性，在不同批次的产品测试中很难进行复制或横向比较，使其在产品的功效验证和比较、优化上很难扩大规模进行重复性测试、对产品研发产生积极的促进作用。
3、因此，亟待一种牙软垢模型，用于在体外
技术实现思路
1、本申请的目的是提供一种可用于在体外对口腔护理产品进行评价测试的牙软垢模型及其构建方法和应用。
2、本申请采用了以下技术方案：
3、本申请的第一方面公开了一种牙软垢模型，包括：基底和附着于所述基底的软垢模拟物，所述软垢模拟物包括唾液沉积物、菌斑沉积物和食物残渣沉积物。需要说明的是，本申请的牙软垢模型，能够模拟口腔内软垢的物理和化学特性，在质地、黏性、颜色等方面与真实软垢极为相似，为口腔护理产品的评价提供更接近实际情况的测试环境。相较于采用临床试验的方法对口腔护理产品进行测试，采用本申请的牙软垢模型，具有批次差异小、指标易于量化、更为科学和客观的优点。
4、本申请的一种实现方式中，所述唾液沉积物和菌斑沉积物呈膜状，且所述唾液沉积物、所述菌斑沉积物和所述食物残渣沉积物互相交联。需要说明的是，本申请中的唾液沉积物、菌斑沉积物和食物残渣沉积物三者之间相互关联，作为整体。具体而言，唾液沉积物为菌斑沉积物的形成提供条件：唾液沉积物形成后，细菌选择性地黏附至唾液沉积物，促进菌斑的形成；菌斑沉积物影响唾液沉积物和食物残渣沉积物的组成和结构：细菌利用唾液沉积物和食物残渣沉积物中的碳源、氮源和无机离子等进行代谢，产生酸性物质和其他代谢产物，影响唾液沉积物和食物残渣沉积物的组成和结构，并进一步促进菌斑沉积物的形成和稳定；食物残渣沉积物影响唾液沉积物和菌斑沉积物的性质：食物残渣中的蛋白质和碳水化合物可以影响唾液沉积物的组成和性质，并影响菌斑的形成和生长。
5、本申请的一种实现方式中，所述唾液沉积物通过将所述基底和人工唾液接触而形成；所述菌斑沉积物通过将形成有所述唾液沉积物的基底置于含有口腔细菌的培养基中培养而形成；所述食物残渣沉积物通过将形成有所述菌斑沉积物的基底置于含有食物残渣的培养基中培养而形成。
6、本申请的一种实现方式中，所述人工唾液的ph为6～6.1，所述人工唾液的组成为：0.5～1.5g/l的nacl、0.1～0.3g/l的kcl、0.1～0.3g/l的cacl2、0.1～0.3g/l的na2hpo4、0.1～0.5g/l的尿素、0.01～0.05g/l的na2s。
7、本申请的一种实现方式中，所述含有口腔细菌的培养基为含有变异链球菌的bhi培养基。
8、本申请的一种实现方式中，所述含有食物残渣的培养基为包括1～5g/l淀粉、1～10g/l黄豆粉、1～10g/l糖类、1～5g/l脱脂奶粉、1～20g/l膳食纤维的bhi培养基。
9、本申请的一种实现方式中，所述牙软垢模型还包括结合于所述软垢模拟物的染料。
10、本申请的一种实现方式中，所述染料为品红或结晶紫。
11、本申请的第二方面公开了一种牙软垢模型的构建方法，包括构建唾液沉积物：将基底置于人工唾液中，以构建所述唾液沉积物；构建菌斑沉积物：将构建有所述唾液沉积物的基底置于含口腔细菌的培养基中培养，以构建所述菌斑沉积物；构建食物残渣沉积物：将构建有所述菌斑沉积物的基底置于含有食物残渣的培养基中培养，以构建所述食物残渣沉积物，即获得所述牙软垢模型。
12、本申请的一种实现方式中，所述构建唾液沉积物的步骤中，包括：在35℃～38℃的条件下，将基底置于人工唾液中12h～36h。
13、本申请的一种实现方式中，所述构建菌斑沉积物的步骤中，包括：在35℃～38℃厌氧条件下，将构建有所述唾液沉积物的基底置于含口腔细菌的培养基中培养12h～72h。
14、本申请的一种实现方式中，所述构建食物残渣沉积物的步骤中，包括：在35℃～38℃厌氧条件下，将构建有所述菌斑沉积物的基底置于食物残渣混合培养基中培养12h～72h。
15、本申请的一种实现方式中，构建所述食物残渣沉积物后，还包括固定和染色的步骤。
16、本申请的一种实现方式中，所述固定和染色的步骤包括：在2℃至6℃的条件下干燥15min至60min，干燥后采用水不溶性染料进行染色0.5h至1.5h，采用磷酸盐缓冲液清洗后在2℃至6℃的条件下保存。
17、本申请的第三方面提供一种采用牙软垢模型对口腔护理产品的清洁功效进行评价的方法，包括：使用口腔护理产品对所述牙软垢模型进行处理，通过对所述牙软垢模型中软垢模拟物进行定性或定量，以对所述口腔护理产品的清洁功效进行评价。
18、本申请的一种实现方式中，对所述牙软垢模型中软垢模拟物进行定量包括以下方式的至少一种：通过细菌培养法或基因检测法对所述牙软垢模型中的口腔细菌的含量进行检测；通过对所述牙软垢模型中软垢模拟物进行图像分析，获取所述软垢模拟物的残留量。
19、本申请的一种实现方式中，对所述牙软垢模型中软垢模拟物进行定量包括：通过显微镜采集图像并分析得到所述牙软垢模型中软垢模拟物的面积和光密度，并通过下式计算：
20、
21、式中，areanc为对照组的软垢模拟物的面积总和，modnc为对照组的软垢模拟物的光密度均值，area样品组为样品组的软垢模拟物的面积总和，mod样品组为样品组的软垢模拟物的光密度均值，对照组是指未经所述口腔护理产品处理的牙软垢模型，样品组是指经所述口腔护理产品处理的牙软垢模型。由此，能够提供一种科学、客观的清洁率的计算方法。
22、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种牙软垢模型，其特征在于，包括：基底和附着于所述基底的软垢模拟物，所述软垢模拟物包括唾液沉积物、菌斑沉积物和食物残渣沉积物。
2.根据权利要求1所述的牙软垢模型，其特征在于，所述唾液沉积物和菌斑沉积物呈膜状，且所述唾液沉积物、所述菌斑沉积物和所述食物残渣沉积物互相交联。
3.根据权利要求1至3任一项所述的牙软垢模型，其特征在于，所述唾液沉积物通过将所述基底和人工唾液接触而形成；所述菌斑沉积物通过将形成有所述唾液沉积物的基底置于含有口腔细菌的培养基中培养而形成；所述食物残渣沉积物通过将形成有所述菌斑沉积物的基底置于含有食物残渣的培养基中培养而形成。
4.根据权利要求3所述的牙软垢模型，其特征在于，所述人工唾液的pH为6～6.1，所述人工唾液包括：0.5～1.5g/L的NaCl、0.1～0.3g/L的KCl、0.1～0.3g/L的CaCl2、0.1～0.3g/L的Na2HPO4、0.1～0.5g/L的尿素、0.01～0.05g/L的Na2S。
5.根据权利要求4所述的牙软垢模型，其特征在于，所述含有口腔细菌的培养基为含有变异链球菌
6.根据权利要求5所述的牙软垢模型，其特征在于，所述含有食物残渣的培养基为包括1～5g/L淀粉、1～10g/L黄豆粉、1～10g/L糖类、1～5g/L脱脂奶粉、1～20g/L膳食纤维的BHI培养基。
7.根据权利要求1所述的牙软垢模型，其特征在于，所述牙软垢模型还包括结合于所述软垢模拟物的染料。
8.一种如权利要求1～7任一项所述的牙软垢模型的构建方法，其特征在于，包括：
9.根据权利要求8所述的构建方法，其特征在于，所述构建唾液沉积物的步骤中，包括：在35℃～38℃的条件下，将基底置于人工唾液中12h～36h；
10.根据权利要求8所述的构建方法，其特征在于，构建所述食物残渣沉积物后，还包括固定和染色的步骤；所述固定和染色的步骤包括：在2℃至6℃的条件下干燥15min至60min，干燥后采用水不溶性染料进行染色0.5h至1.5h，采用磷酸盐缓冲液清洗后在2℃至6℃的条件下保存。
11.一种采用如权利要求1至7任一项所述的牙软垢模型对口腔护理产品的清洁功效进行评价的方法，其特征在于，包括：使用口腔护理产品对所述牙软垢模型进行处理，通过对所述牙软垢模型中软垢模拟物进行定性或定量，以对所述口腔护理产品的清洁功效进行评价。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，对所述牙软垢模型中软垢模拟物进行定量包括以下方式的至少一种：通过细菌培养法或基因检测法对所述牙软垢模型中的口腔细菌的含量进行检测；通过对所述牙软垢模型中软垢模拟物进行图像分析，获取所述软垢模拟物的残留量；
...【技术特征摘要】
1.一种牙软垢模型，其特征在于，包括：基底和附着于所述基底的软垢模拟物，所述软垢模拟物包括唾液沉积物、菌斑沉积物和食物残渣沉积物。
2.根据权利要求1所述的牙软垢模型，其特征在于，所述唾液沉积物和菌斑沉积物呈膜状，且所述唾液沉积物、所述菌斑沉积物和所述食物残渣沉积物互相交联。
3.根据权利要求1至3任一项所述的牙软垢模型，其特征在于，所述唾液沉积物通过将所述基底和人工唾液接触而形成；所述菌斑沉积物通过将形成有所述唾液沉积物的基底置于含有口腔细菌的培养基中培养而形成；所述食物残渣沉积物通过将形成有所述菌斑沉积物的基底置于含有食物残渣的培养基中培养而形成。
4.根据权利要求3所述的牙软垢模型，其特征在于，所述人工唾液的ph为6～6.1，所述人工唾液包括：0.5～1.5g/l的nacl、0.1～0.3g/l的kcl、0.1～0.3g/l的cacl2、0.1～0.3g/l的na2hpo4、0.1～0.5g/l的尿素、0.01～0.05g/l的na2s。
5.根据权利要求4所述的牙软垢模型，其特征在于，所述含有口腔细菌的培养基为含有变异链球菌的bhi培养基。
6.根据权利要求5所述的牙软垢模型，其特征在于，所述含有食物残渣的培养基为包括1～5g/l淀粉、1～10g/l黄豆粉、1～10g/l糖类、1～5g/l脱脂奶粉、1～2...
【专利技术属性】
技术研发人员：樊晓，杨积力，
申请(专利权)人：广州星际悦动股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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