一种小鼠皮肤消化复合酶及小鼠皮肤T细胞的分离方法技术

技术编号:45023404 阅读:23 留言:0更新日期:2025-04-18 17:05
本发明专利技术属于T细胞分离技术领域,具体公开了一种小鼠皮肤消化复合酶及小鼠皮肤T细胞的分离方法,在消化皮肤组织时加入胰酶,在消化皮肤组织后进行Percoll密度梯度离心,在消化液加入β‑ME,在消化液加入维生素C。本发明专利技术与现有技术相比,分离得到的T细胞显著增加。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及t细胞分离,特别涉及一种小鼠皮肤消化复合酶及小鼠皮肤t细胞的分离方法。


技术介绍

1、t淋巴细胞是免疫系统的重要组成部分,当它们发生病变产生克隆性增生,并主要在皮肤组织中积聚、增殖时,就导致了皮肤t细胞淋巴瘤。

2、因此,在皮炎,皮肤癌以及一些自身免疫等疾病模型中皮肤t细胞发挥重要功能,受到广泛研究,但t细胞在皮肤含量低,难分离获得足够的数量,同时分离过程中t细胞易死亡,活性易受损等。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是为了解决
技术介绍
存在的技术问题,为此,提供了一种小鼠皮肤消化复合酶及小鼠皮肤t细胞的分离方法。

2、为了实现上述目的,本专利技术所采用的技术方案如下:

3、一种小鼠皮肤消化复合酶,所述小鼠皮肤消化复合酶由以下终浓度的组分组成:rpmi 1640培养基、终浓度是10%的胎牛血清、终浓度是1%的青霉素/链霉素双抗溶液、终浓度是1%的hepes缓冲液、终浓度是1%的glutamax、终浓度是1%的neaa、终浓度是0.1mg/ml的脱氧核糖核酸酶、本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种小鼠皮肤消化复合酶,其特征在于,所述小鼠皮肤消化复合酶由以下终浓度的组分组成:RPMI 1640培养基、终浓度是10%的胎牛血清、终浓度是1%的青霉素/链霉素双抗溶液、终浓度是1%的HEPES缓冲液、终浓度是1%的GlutaMAX、终浓度是1%的NEAA、终浓度是0.1mg/ml的脱氧核糖核酸酶、终浓度是2mg/ml的IV型胶原酶、终浓度是0.5mg/ml的透明质酸酶以及终浓度是0.25%的胰酶;

2.一种小鼠皮肤T细胞的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.如权利要求2所述的一种小鼠皮肤T细胞的分离方法,其特征在于,当配制的小鼠皮肤消化复合酶由以下终...

【技术特征摘要】

1.一种小鼠皮肤消化复合酶,其特征在于,所述小鼠皮肤消化复合酶由以下终浓度的组分组成:rpmi 1640培养基、终浓度是10%的胎牛血清、终浓度是1%的青霉素/链霉素双抗溶液、终浓度是1%的hepes缓冲液、终浓度是1%的glutamax、终浓度是1%的neaa、终浓度是0.1mg/ml的脱氧核糖核酸酶、终浓度是2mg/ml的iv型胶原酶、终浓度是0.5mg/ml的透明质酸酶以及终浓度是0.25%的胰酶;

2.一种小鼠皮肤t细胞的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.如权利要求2所述的一种小鼠皮肤t细胞的分离方法,其特征在于,当配制的小鼠皮肤消化复合酶由以下终浓度的组分组成:rpmi 1640培养基、终浓度是10%的胎牛血清、终浓度是1%的青霉素/链霉素双抗溶液、终浓度是1%的hepes缓冲液、终浓度是1%的glutamax、终浓度是1%的neaa、终浓度是100µm的β-me、终浓度是50 µm的维生素c、终浓度是0.1mg/ml的脱氧核...

【专利技术属性】
技术研发人员:张端午张雨琪任婷蓉
申请(专利权)人:复旦大学附属儿科医院
类型:发明
国别省市:

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