一种表达III型胶原蛋白COL17A1的重组工程菌的制备方法技术

本发明专利技术涉及胶原蛋白技术领域，且公开了一种表达III型胶原蛋白COL17A1的重组工程菌的制备方法，合成人源III型胶原蛋白的优化序列，并在序列两端加上适当的限制性酶切位点。该表达III型胶原蛋白COL17A1的重组工程菌的制备方法，通过采用酵母表达体系对目的序列进行密码子优化，根据毕赤酵母等酵母菌株的密码子偏爱性，提供OptimumGeneTM密码子优化，进一步提高重组蛋白的产量。选择合适的载体在毕赤酵母中实现高效表达。如pGAPZ A‑αA载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白，是一种组成型基因表达载体，在细胞内无论环境如何变化，都能维持稳定的表达速率。无需外加诱导剂，简化了生产工艺，降低了生产成本，提高了生产效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，具体涉及一种表达iii型重组胶原蛋白的工程菌的制备方法。

技术介绍

1、iii型胶原蛋白作为人体皮肤中的重要成分，在维持皮肤弹性、保护血管神经、改善细胞微环境、促进伤口愈合、减轻皮肤炎症等方面发挥着重要作用。目前，胶原蛋白的获取方法主要有动物组织提取和基因工程方法制备两种。动物组织提取的胶原蛋白通常是多种不同分子量胶原蛋白的混合物，难溶于水且生物相容性较差，还存在免疫原性风险。而基因工程方法制备的胶原蛋白可以避免这些问题，通过大肠杆菌或者毕赤酵母高密度发酵，能够实现高表达量，更利于产业化。毕赤酵母是常用的细胞工厂之一，但甲醇营养型酵母表达系统存在局限性。本专利技术旨在实现人源iii型胶原蛋白在毕赤酵母中持续稳定高表达和规模化生产的目标。

2、本专利采用毕赤酵母作为表达宿主，构建重组工程菌来表达iii型胶原蛋白。毕赤酵母具有诸多优点，如简单易于培养、成本低表达量高、真核表达系统可以对外源蛋白进行修饰且不含有细菌内毒素等。

3、毕赤酵母是甲基营养型酵母，具有高效表达外源蛋白的能力，外源蛋白的表达量可达细胞总蛋白的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达III型胶原蛋白COL17A1的重组工程菌的制备方法，包括毕赤酵母，其特征在于：制备方法如下：

【技术特征摘要】

1.一种表达iii型胶原蛋白col17a1的重组工程菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：信艳东，任明艳，
申请(专利权)人：法艾诗重庆生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：