酮还原酶突变体及其在合成(R)-邻氯扁桃酸甲酯中的应用制造技术

本发明专利技术提供酮还原酶突变体，其氨基酸序列是在对序列表SEQ ID No.1所示序列进行突变而来，所述突变包括对序列表SEQ ID No.1所示序列中的第24、25、116、193、234、238、245位氨基酸至少一个突变。本发明专利技术还提供相应的核酸、重组表达载体、基因工程菌及其在合成(R)‑邻氯扁桃酸甲酯中的应用。本发明专利技术的酮还原酶突变体可以催化高浓度邻氯苯甲酰甲酸甲酯为底物的不对称还原反应合成(R)‑邻氯扁桃酸甲酯，产率高且满足99％+立体选择性的要求，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程，涉及酮还原酶突变体，还涉及一种编码上述酮还原酶突变体的核酸，包含上述酮还原酶突变体的表达载体、制备方法和应用，具体涉及其在催化合成(r)-邻氯扁桃酸甲酯中的应用。

技术介绍

1、酮还原酶在生物催化领域具有重要应用，通过催化酮的还原反应生成相应的手性醇，广泛应用于医药、农业和化工等行业。传统的化学合成方法往往需要多步反应和严格的条件，通常产率较低且副产物较多。因此，采用酶催化的方法来合成高纯度、高选择性的目标产物逐渐成为研究热点。(r)-邻氯扁桃酸甲酯作为畅销抗血小板药物(s)-氯吡格雷重要的中间体，在有机合成和药物开发中具有广泛应用。然而，合成(r)-邻氯扁桃酸甲酯的传统方法存在步骤复杂、条件苛刻和环境不友好的问题。为了提高合成效率和环境友好性，开发高效、稳定且具有高立体选择性的酮还原酶成为关键。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种酮还原酶突变体，通过定向进化和理性设计，提高了酶的催化性能、立体选择性和热稳定性、ph稳定性。该突变体能够以催化邻氯苯甲酰甲本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.酮还原酶突变体，其特征在于：其氨基酸序列是在对序列表SEQ ID No.1所示序列进行突变而来，所述突变包括对序列表SEQ ID No.1所示序列中的第24、25、116、193、234、238、245位氨基酸至少一个突变。

2.根据权利要求1所述的酮还原酶突变体，其特征在于：所述突变包括对序列表SEQ IDNo.1所示序列的下述至少一种突变：I238G、I238T、F25P、I234G、V24G、F25Y、H116I、W193Y和E245L。

3.根据权利要求2所述的酮还原酶突变体，其特征在于：所述突变包括对序列表SEQ IDNo.1所示序列的下述至少两种突...

【技术特征摘要】

1.酮还原酶突变体，其特征在于：其氨基酸序列是在对序列表seq id no.1所示序列进行突变而来，所述突变包括对序列表seq id no.1所示序列中的第24、25、116、193、234、238、245位氨基酸至少一个突变。

2.根据权利要求1所述的酮还原酶突变体，其特征在于：所述突变包括对序列表seq idno.1所示序列的下述至少一种突变：i238g、i238t、f25p、i234g、v24g、f25y、h116i、w193y和e245l。

3.根据权利要求2所述的酮还原酶突变体，其特征在于：所述突变包括对序列表seq idno.1所示序列的下述至少两种突变：f25p或f25y、i238g或i238t、w193y和e245l；

4.根据权利要求3所述的酮还原酶突变体，其特征在于：所述突变选自对序列表seq idno.1所示序列的下述任意一种突变：i238g/f25y、i238t/f25y、i238g/f25p、i238t/f25p、i238g/w193y、i238t/w193y、i238g/e245l、i238t/e245l、i238g/f25y/w193y、i238t/f25y/w193y、i238g/f25y/e245l、i238...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜艳军，杜浪，马丽，原泉，周丽亚，贺莹，梁颖卓，魏建阳，崔思凡，刘剑桥，张淑玲，张雨晴，
申请(专利权)人：河北工业大学，
类型：发明
国别省市：