利用基于α病毒且靶向高亲和性层粘连蛋白受体的载体进行肿瘤治疗制造技术

本发明专利技术涉及利用优先地靶向肿瘤细胞的载体治疗肿瘤的方法和组合物。具体而言，本发明专利技术涉及基于α病毒（优选基于辛德比斯病毒）的载体和基于非α病毒的载体，它们对于高亲和性层粘连蛋白受体（ＨＡＬＲ）具有优先的亲和性。这些载体有效地靶向肿瘤并且具有引起肿瘤坏死的能力。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及癌症的病毒载体疗法，特别是相对于体内的正常细胞来说，可以一种特异性方式来诱导肿瘤细胞凋亡。
技术介绍
癌症基因治疗在很大程度上受益于一种载体(vector)的提供，这种载体具有一种高效率的基因表达能力并且具有靶向肿瘤细胞的能力。已经开发了大量的转染系统来传递异源基因进入体内肿瘤以研究癌症基因治疗，但是所有这些系统都有局限性。例如，因为逆转录病毒载体可以介导稳定的基因传递，同时可能具有低的免疫原性，所以它们已经被用作基因传递；然而，它们的传递效率相对较低(见，例如，Di Ianni等J.Hematother.Stem.Cell Res.，1999，8645-652；Morling等，Gene Ther.，1995，2504-508；Lam等，Hum.Gene Ther.，1996，71415-1422；Kume等，Stem Cells，1999，17226-232)，而且微生物系变异也是一个潜在的问题(见Thompson，Science，1992，2571854)。另外，逆转录病毒载体(只有少数例外)易被人类血液中的血清组分裂解(见Miyao等，Hum Gene Ther，1997，81575-1583；Russell等，Hum Gene Ther，1995，6635-641和Rother等，J Exp Med，1995，1821345-55)。这一点很大程度地限制了它们在体内的应用。腺病毒载体似乎可以更有效地进行体内基因的传递，但是这些载体只能以一种局限性的方式应用，这是因为它们缺乏通过血流被传递的能力(见Duncan等，J GenVirol.，1978，4045-61；Alemany等，J Gen Virol.，2000，81 Pt 112605-2609和Alemany等，Nat Biotechnol.，2000，18723-727)，并且由于腺病毒蛋白的高免疫原性而可能会对病人造成毒性(见Ginsberg，Bulletin ofthe New York Acad.Med.，1996，7353-58和Sparer等，J.Virol.，1997.712277-2284)。尽管有上述这些进展，但是癌症仍旧是一个需要新的解决方案的主要的公共健康问题。目前，发展治疗载体的努力在于解决载体安全性和治疗基因表达有效性的问题。α病毒载体的许多性质使它们成为其它正在开发的病毒衍生的基因传递系统的所希望的替代选择，这些性质包括如下能力(i)快速地设计表达构建物，(ii)生产高效价感染粒子原种，(iii)感染不分裂细胞，和(iv)获得高水平的表达(Strauss and Strauss，Microbiol.Rev.1994，58491-562；Liljestrm等，Biotechnology 1991，91356-1361；Bredenbeek等，Semin.Virol.1992，3297-310；Xiong等，Science 1993，2431188-1191)。缺陷型的辛德比斯病毒载体已经用来保护哺乳动物免受原生寄生虫，蠕虫寄生虫，体外寄生虫、真菌、细菌和病毒损害(PCT公开号WO 94/17813)。对于一种编码委内瑞拉马脑炎(VEE)的cDNA和制备减毒的外衣病毒的方法已有描述(美国专利号5,185,440)。缺陷型辛德比斯病毒载体已经通过将异源序列插入到基因组的结构区域中制备得到了(美国专利号5,217,879)。另外，基于具有异源序列的新德比斯缺陷型干扰(DI)粒子的RNA载体也已有描述(美国专利号5,091,309)。α病毒，特别是塞姆利基森林病毒，被用于医疗中来传递编码外源性RNA的异源基因，例如，一种抗原的抗原决定部位或决定簇(PCT公开号WO 95/27069和WO95/07994)。也已经公开了从一个α病毒碱基序列的下游异源序列的增强的表达载体(PCT公开号WO 95/31565)。基于α病毒的载体也用于免疫蛋白产生或蛋白序列表达(PCT公开号WO 92/10578)。一种用于α病毒载体的cDNA构建物可以被引入并在动物或人类细胞中转录(PCT公开号WO95/27044)。辛德比斯病毒是α病毒属中的一员，自其发现以来从1953年开始在世界各地对其已经进行了广泛的研究(见Taylor等，Egypt.Med Assoc.，1953，36489-494；Taylor等，Am.J.Trop.Med Hyg，1955，4844-862和Shah等，Ind.J.Med.Res，1960，48300-308)。像许多其它α病毒一样，辛德比斯病毒可以通过蚊向脊椎动物宿主传递。α病毒体由一种壳核组成，里面包裹着一脂质双层，在其上具有包膜蛋白。包膜蛋白是与宿主细胞受体结合的媒介，由此导致病毒体的胞吞作用。胞吞后，壳核(衣壳蛋白和染色体组病毒RNA的一种复合物)沉积入宿主细胞的细胞质。辛德比斯病毒基因组是一种11703n的单链49S RNA(Strauss等，1984，Virology，13392-110)，在5’末端盖帽并在3’末端聚腺苷酰化。基因组RNA是(+)-义的并具传染性，在受感染的细胞中作为mRNA。基因组RNA的翻译产生了非结构蛋白，nsP1，nsP2，nsP3和nsP4，它们被生产作为聚蛋白并且是经过蛋白水解加工的。感染早期，非结构蛋白，可能与宿主一起利用基因组(+)-义RNA作为模板来生成一个全长的、互补(-)链RNA。(-)链是合成全长基因组RNA的模板。(-)链上的一个内部启动子被用于亚基因组的26S mRNA的转录，此mRNA和三分之一的基因组RNA的3’末端是共线性的。这一26S亚基因组mRNA被翻译来产生一种结构聚蛋白，它经历共翻译和翻译后裂解来生产结构蛋白C(壳体)，E2和E1(包膜)。壳体蛋白C使基因组RNA包壳来形成壳核。这些与细胞表面结合病毒包膜蛋白的胞浆功能域相互作用，导致了壳核包裹入包含包膜蛋白的膜双层和病毒体后代从受感染细胞出芽。辛德比斯病毒感染已经显示在宿主细胞内诱导细胞凋亡(Levine等，Nature，1993，361；739-742；Jan AND GRIFFIN，J.Virol.，1999，7310296-10302)。虽然基于辛德比斯病毒的基因转导在体外已经有了很好的研究(见Straus等，Microbiol.Rev.，1994，58491-562；Altman-Hamamdzic等，Gene Ther.，1997，4；815-822；Gwag等，Mole.Brain Research.，1998，6353-61；Bredenbeek等，J Virol，1993，67；6439-6446；Liljestrom等，Biotechnology，1991，91356-1361；Piper等，Meth.Cell Biol.，1994，4355-78和Grusby等，Proc Natl.Acad.Sci U S A.，1993，903913-3917)，并且有许多关于在体内辛德比斯病毒转移入中枢神经系统的报道(Duncan等，J Gen Virol.，1978，4045-61；Alemany等，J Gen Virol.，2000，81 Pt本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗患肿瘤的哺乳动物的方法，该方法包括向患有此肿瘤的哺乳动物施用治疗肿瘤有效量的一种基于α病毒的载体，其中的载体没有被修饰来靶向一个肿瘤特异性细胞决定簇。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：D梅鲁埃洛，
申请(专利权)人：纽约大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]