用于分析试剂的载体颗粒胶乳和分析试剂制造技术

本发明专利技术的目的是提供一种用于分析试剂的载体颗粒胶乳以及使用它的分析试剂，所述分析试剂能够在免疫血清学检验中在广泛浓度范围内测定生物样品并可以延长期稳定保存。本发明专利技术是一种用于分析试剂的包含载体颗粒的载体颗粒胶乳，所述载体颗粒包含具有苯基的可聚合单体和具有苯基和磺酸基的可聚合单体的共聚物，其中所述载体颗粒表面磺酸基的量为０．００５－０．７μｍｏｌ／ｍ↑［２］并且平均粒度为０．０１－１．５μｍ。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于分析试剂的载体颗粒胶乳以及使用它的分析试剂，所述分析试剂能够在免疫血清学检验中测定广泛浓度范围的生物样品并可以稳定保存一段延长期。
技术介绍
在临床实验室检验领域，使用生物样品(血，尿等)诊断各种疾病，作为用于诊断它们的方法，已经开发和使用了各种测定法。该测定法的代表是利用酶促反应的生物化学测定法和利用抗原-抗体反应的免疫测定法。作为在该诊断中使用的试剂，已经开发了有关妊娠试验，检测类风湿因子的RA检验，检测C-反应蛋白的CRP检验以及针对乙型肝炎表面抗原(HBs抗原)，抗HBs抗体，β2微球蛋白抗体，支原体抗原，核酸，核蛋白，雌激素，抗雌激素抗体等的检验的试剂。作为该测定法，可以举例说明免疫浊度测定法(TIA法)，胶乳浊度测定法(LIA法)，酶免疫测定(EIA法)和放射免疫测定(RIA法)，并且取决于目的适当地选择。在上面列出的那些中，应用LIA法来检测各种抗原和抗体，因为它是方便的并能够被迅速实施，其中使用抗原或抗体将通过将载体颗粒分散至水性介质中形成的胶乳载体颗粒敏化，然后将其用来检测作为载体颗粒聚集反应的与血清中相应抗体或抗原的反应。医疗实践最近的趋势是从疾病的常规诊断向疾病预防转变。因此，通过在疾病发作前检验血液等，预先鉴定疾病的诱因，由此实现预防。为了应用该预防医疗，在实行LIA法等过程中要求更高的灵敏度。尽管免疫血清学检验如抗原抗体反应最初测定少量物质，在预防医疗中使用的分析试剂应该能够检测更低浓度的疾病相关痕量蛋白(抗原和/或抗体)。因此，比当前使用的那些更灵敏的分析试剂变得必需。鉴于上面讨论的问题，已经目益改进用于测定少量样品和少量试剂的免疫检验的自动免疫分析仪的仪器，并相应提出在该仪器中使用试剂更高灵敏度的要求。作为提高该试剂灵敏度的方法，举例说明一种方法，其中通过提高使用的载体颗粒的粒度由此提高光密度变化的数值来试图以更高的灵敏度测定分析物。日本Kokoku出版物Sho-58-50645公开了用于生产胶乳的方法，其包含在没有乳化剂的情况下在水中使用过硫酸盐作为引发剂将苯乙烯与基于所述苯乙烯10％重量或更少的苯乙烯磺酸盐共聚合，接着在碱性条件下加热，表明通过增大基于苯乙烯单体的催化剂的量可以获得由粒度为0.3-0.8μm的载体颗粒组成的胶乳。在另一方面，日本Kokoku出版物Hei-1-36484公开了通过在含有二价金属氧化物或氢氧化物的水溶液中合成胶乳来生产诊断试剂的方法。然而，使用包含大粒度载体颗粒的胶乳的方法涉及问题，即当分析物以高浓度存在时，由载体颗粒聚集导致的光密度变化超出可检测范围而不能获得对应于分析物的量的光密度改变，它可能反映非特异性聚集反应并且此外，由于缺乏稳定性不能延长期保存。在另一方面，日本Kokai出版物Sho-63-65369公开了使用胶乳试剂的方法，所述胶乳试剂是通过使用抗体或抗原敏化包含两种或多种具有不同平均粒度的载体颗粒的胶乳并以一定比率混合而获得的。该方法试图取得具有两种分布图(profile)的性能，即基于包含小粒度载体颗粒的胶乳的广泛范围测定和基于由大粒度载体颗粒组成的胶乳的在低浓度范围下的高灵敏度。日本Kokoku出版物Sho-63-14783公开了由两种具有不同粒度范围的载体颗粒组成的胶乳，所述载体颗粒装载至少两种不同的量的相同抗原或抗体。日本专利号2588174公开了测定抗原抗体反应的方法，其包含将胶乳与针对致敏性抗体的抗原或针对致敏性抗原的抗体在水中反应并测量在照射时吸光度的变化，所述胶乳是通过使用抗原或抗体敏化两种或多种具有不同平均粒度的颗粒接着混合而获得的胶乳或者是通过混合两种或多种具有不同平均粒度的颗粒接着用抗原或抗体敏化而获得的胶乳，其中混合平均粒度为0.05-0.3μm的载体颗粒和平均粒度为0.3-1.0μm的载体颗粒，并且其中所照射的光其波长至少是混合颗粒平均粒度的2.5倍，也就是0.6-2.4μm。日本Kokai出版物Hei-5-18973公开了一种免疫测定法，其包含，取决于通过免疫反应待测的组分的量，将其中与待测组分反应的组分是不溶解的粒度为0.1μm或更小的载体颗粒与至少一种与待测组分反应的组分和其中活性组分是不溶解的粒度大于0.1μm的载体颗粒结合，并进行与含有待测组分的样品的反应，以及在其中使用的试剂。然而，使用由数种具有不同平均粒度的载体颗粒组成胶乳的该方法难以制备胶乳试剂，并且存在问题，即，即使相同操作者按照确定方案使用具有相同平均粒度和相同CV值的颗粒制备试剂，获得的试剂在制剂性能方面一次一次不同。专利技术概述本专利技术的目的是提供用于分析试剂的载体颗粒胶乳以及使用它的分析试剂，所述分析试剂在免疫血清学检测中能够测定广泛浓度范围的生物样品并可以稳定保存一段延长期。本专利技术的第一方面是用于分析试剂的包含载体颗粒的载体颗粒胶乳，所述载体颗粒包含具有苯基的可聚合单体与具有苯基和磺酸基的可聚合单体的共聚物，其中所述载体颗粒表面磺酸基的量为0.005-0.7μmol/m2，平均粒度为0.01-1.5μm。本专利技术的第二方面是用于分析试剂的包含载体颗粒的载体颗粒胶乳，所述载体颗粒包含具有苯基的可聚合单体与具有苯基和磺酸基的可聚合单体的共聚物，其中所述载体颗粒包含两种或多种具有不同表面磺酸基量的颗粒。在按照本专利技术第二方面用于分析试剂的载体颗粒胶乳中，优选所述载体颗粒表面磺酸基的量为0.005-0.7μmol/m2。在按照本专利技术第二方面用于分析试剂的载体颗粒胶乳中，优先所述载体颗粒包含表面磺酸基的量为0.005μmol/m2或更高并且小于0.12μmol/m2的载体颗粒(A)和表面磺酸基的量为0.12μmol/m2或更高和0.7μmol/m2或更小的载体颗粒(B)。在按照本专利技术第二方面用于分析试剂的载体颗粒胶乳中，优选包含的载体颗粒(A)和载体颗粒(B)的重量比是由(A)/(B)＝1/10-10/1表示。本专利技术的第三方面是用于分析试剂的包含载体颗粒的载体颗粒胶乳，所述载体颗粒包含具有苯基的可聚合单体与具有苯基和磺酸基的可聚合单体的共聚物，其中所述载体颗粒的平均粒度为0.04-0.1μm，粒度的CV值为8-20％。在按照本专利技术第三方面用于分析试剂的载体颗粒胶乳中，优先所述载体颗粒表面磺酸基的量为0.005-0.7μmol/m2。优选按照本专利技术第一，第二或第三方面用于分析试剂的载体颗粒胶乳基本上不含乳化剂。此外，在按照本专利技术第一，第二或第三方面用于分析试剂的载体颗粒胶乳中，优选具有苯基的可聚合单体是苯乙烯，具有苯基和磺酸基的可聚合单体是苯乙烯磺酸盐。本专利技术的第四方面是分析试剂，其中在按照本专利技术第一，第二或第三方面的分析试剂的载体颗粒胶乳的载体颗粒上承载与分析物特异性结合的物质。附图简述附图说明图1显示在制备实施例1至3和比较例1至4中制备的分析试剂后立即进行的样品测定结果。图2显示在实施例1至3和比较例1至4中制备的分析试剂的稳定性检验后进行的样品测定结果。图3显示在制备实施例4和比较例5中制备的分析试剂后立即进行的样品测定结果。图4显示在实施例4和比较例5中制备的分析试剂的稳定性检验后进行的样品测定结果。图5显示使用在实施例5至7中制备的试剂的样品测定结果。图6显示使用在比较例6至8中制备的试剂的样本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于分析试剂的包含载体颗粒的载体颗粒胶乳，所述载体颗粒包含具有苯基的可聚合单体和具有苯基和磺酸基的可聚合单体的共聚物，其中所述载体颗粒具有０．００５－０．７μｍｏｌ／ｍ↑［２］的表面磺酸基量和０．０１－１．５μｍ的平均粒度。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：尾花敏，
申请(专利权)人：积水化学工业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]