一种重组纤连蛋白及其制备、纯化方法和应用技术

技术编号:44933230 阅读:46 留言:0更新日期:2025-04-08 19:15
本发明专利技术公开了一种重组纤连蛋白及其制备、纯化方法和应用。本发明专利技术首先截取天然纤连蛋白核心活性区域(氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示),经密码子优化后(其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示),构建一株高表达重组纤连蛋白的菌株GS115/pPIC9K‑FN,然后找到一种操作简便,成本较低的制备重组纤连蛋白的发酵和纯化技术,适合工业化大规模生产,且制备的纤连蛋白同时在对Hacat细胞的粘附作用和弹性蛋白酶抑制方面具有较好的效果,从而具有促进细胞修复和紧致的功效。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白质工程和基因工程,具体涉及一种重组纤连蛋白及其制备、纯化方法和应用


技术介绍

1、纤连蛋白最初是morrison于1948年发现的,由于其遇冷会沉淀的特性,最初被称为冷不溶球蛋白(cold insoluble globulin),现在一般称为纤维连接蛋白fibronectin,英文缩写为fn。纤连蛋白(fn)是一种分子量约为440kda的大糖蛋白,由2个分子质量为220kda的亚基通过二硫键连接而成的二聚体,整个分子形状是由两条相似的a链及b链组成,呈v形。在人体中纤连蛋白共有20余种,广泛存在于血液、体液及各种组织中,是细胞外基质(ecm)中普遍存在的重要成分,它既是细胞活动过程中的调节因子,也是维持、指导组织结构和ecm组成的重要支架蛋白。

2、天然纤连蛋白和胶原蛋白都可以从动物组织中提取,但产量有限、成本高,制备的产品质量批次间差异大,成分复杂;同时还存在携带病原体的风险,因此限制了纤连蛋白在医学和众多科研领域的广泛应用。dna重组技术能够解决纤连蛋白制备的难题,但是重组纤连蛋白的制备还涉及到较为复杂的纯化问题,目前,本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组纤连蛋白,其特征是,其选自:

2.一种能够编码权利要求1所述重组纤连蛋白的核酸分子,所述核酸分子选自:

3.一种重组表达载体,所述重组表达载体包含权利要求2所述的核酸分子。

4.如权利要求3所述的重组表达载体,其特征是,所述重组表达载体为重组表达载体pPIC9K-FN。

5.一种宿主菌,所述宿主菌含有权利要求3所述的重组表达载体或染色体整合有权利要求2所述的核酸分子或者权利要求1所述的重组纤连蛋白。

6.如权利要求5所述的宿主菌,其特征是,其为重组毕赤酵母GS115/pPIC9K-FN。

<p>7.权利要求1所...

【技术特征摘要】

1.一种重组纤连蛋白,其特征是,其选自:

2.一种能够编码权利要求1所述重组纤连蛋白的核酸分子,所述核酸分子选自:

3.一种重组表达载体,所述重组表达载体包含权利要求2所述的核酸分子。

4.如权利要求3所述的重组表达载体,其特征是,所述重组表达载体为重组表达载体ppic9k-fn。

5.一种宿主菌,所述宿主菌含有权利要求3所述的重组表达载体或染色体整合有权利要求2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘英杰黄伟苏淮王啸尘徐佩佩徐荣荣杨素珍王艺纯石林刘浩然
申请(专利权)人:山东福瑞达生物股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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