基于RT-RPA和CRISPR/Cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系、试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系、试剂盒及其使用方法。所述烈性病毒为刚果热病毒、裂谷热病毒、尼帕病毒或亨德拉病毒；所述检测体系包括RT‑RPA等温扩增体系和CRISPR/Cas12a反式切割检测体系；所述RT‑RPA等温扩增体系包括基于病毒核酸设计的RT‑RPA正向引物和反向引物；所述CRISPR/Cas12a反式切割检测体系包括基于病毒核酸设计的crRNA序列。所述试剂盒包括所述RT‑RPA等温扩增体系和CRISPR/Cas12a反式切割检测体系。本发明专利技术首次基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a系统检测四种烈性病毒核酸，具有特异性强、灵敏度高、简单快速、不依赖复杂大型仪器等优点，可在临床样品检测中广泛应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，涉及一种基于rt-rpa和crispr/cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系及试剂盒。

技术介绍

1、刚果热病毒(crimean congo hemorrhagic fever virus，cchfv)又称克里米亚-刚果出血热病毒，是一种蜱虫传播的烈性病毒，属于布尼亚病毒目(bunyavirales)，内罗病毒科(nairoviridae)，正内罗病毒属(orthonairovirus)。具有高度传染性，主要形成以蜱虫→动物→人，以及蜱虫→人→人的传播链。人感染会表现出严重出血并伴随多器官损伤性临床症状，临床主要表现为头痛、发热、呕吐、出血、休克等症状，严重时可导致死亡，病死率为10-40％。目前，刚果热病毒的实验室诊断主要有血清学诊断、分子生物学方法和病毒培养等方法。血清学检测技术主要有间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验以及免疫层析技术。但间接免疫荧光法对实验室条件有一定要求，且操作过程较为繁琐，需要专业人员进行；酶联免疫吸附试验需要特定设备，且操作过程需要严格控制以避免假阳性或假阴性结果；免疫层析技术灵敏度及特异性较低。分子生物学检本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于RT-RPA和CRISPR/Cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系，其特征在于，所述烈性病毒为刚果热病毒、裂谷热病毒、尼帕病毒或亨德拉病毒；所述检测体系包括RT-RPA等温扩增体系和CRISPR/Cas12a反式切割检测体系；

2.如权利要求1所述的一种基于RT-RPA和CRISPR/Cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系，其特征在于，所述CRISPR/Cas12a反式切割检测体系中含crRNA(500nM)2μL，还包括：

3.根据权利要求2所述的一种基于RT-RPA和CRISPR/Cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系，其特征在于，所述RT-RPA...

【技术特征摘要】

1.一种基于rt-rpa和crispr/cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系，其特征在于，所述烈性病毒为刚果热病毒、裂谷热病毒、尼帕病毒或亨德拉病毒；所述检测体系包括rt-rpa等温扩增体系和crispr/cas12a反式切割检测体系；

2.如权利要求1所述的一种基于rt-rpa和crispr/cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系，其特征在于，所述crispr/cas12a反式切割检测体系中含crrna(500nm)2μl，还包括：

3.根据权利要求2所述的一种基于rt-rpa和crispr/cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系，其特征在于，所述rt-rpa等温扩增体系中含正向引物(10μm)1μl，反向引物(10μm)1μl，还包括：

4.一种基于rt-rpa和crispr/cas12a的烈性病毒核酸快...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱启运，杨鹏飞，徐帅，凌东奇，柳煊博，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心，
类型：发明
国别省市：