【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及属于合成生物学领域。更具体地，本专利技术在例如盐单胞菌halomonasbluephagenesis中构建了从δ-戊内酯(δ-valerolactone)合成聚戊内酯的非天然代谢通路，实现了聚戊内酯在盐单胞菌h.bluephagenesis中的生物合成。
技术介绍
1、halomonas bluephagenesis是一种耐高温和高ph的嗜盐微生物，拥有天然合成聚羟基脂肪酸(聚3-羟基丁酸)(phb)的能力，是下一代工业生物技术的优良菌株。其开放式连续发酵的特点拥有节约能源，降低成本等不可替代的优点，具有独特的发酵优势和市场竞争力。目前对于嗜盐菌株的基因组注释和基因编辑方法已经较为成熟，因此具备开发丰富产物的潜能。
2、聚戊内酯(pvl)是一种聚羟基脂肪酸均聚物，由于其生物降解性、生物相容性和渗透性，pvl和基于pvl的共聚物被报道用于药物递送载体、细胞培养基质、食品和药物包装和涂料等，在食品、药品和工业应用中具有很大的应用潜能。
3、首先，h.bluephagenesis天然合成phb依赖于内源β...
【技术保护点】
1.一种生产聚戊内酯(PVL)的工程菌，其表达或过表达外源或内源聚羟基脂肪酸聚合酶和5-羟基丁酸单体的辅酶A连接酶，优选所述工程菌不具有或者已经被敲除或敲低了内源β-酮硫解酶(PhaA)基因、乙酰乙酰辅酶A还原酶(PhaB)基因、PHA聚合酶(PhaC)基因和烯酯酰辅酶A水合酶(FadB)基因中的一种或多种(优选全部)。
2.根据权利要求1所述的工程菌，其不能或者几乎不能生产聚3-羟基丁酸(PHB)，例如在以葡萄糖为碳源的矿物培养基中。
3.根据权利要求1或2所述的工程菌，其中所述工程菌选自嗜盐菌，优选选自盐单胞菌属(Halomonas)、假单...
【技术特征摘要】
1.一种生产聚戊内酯(pvl)的工程菌，其表达或过表达外源或内源聚羟基脂肪酸聚合酶和5-羟基丁酸单体的辅酶a连接酶，优选所述工程菌不具有或者已经被敲除或敲低了内源β-酮硫解酶(phaa)基因、乙酰乙酰辅酶a还原酶(phab)基因、pha聚合酶(phac)基因和烯酯酰辅酶a水合酶(fadb)基因中的一种或多种(优选全部)。
2.根据权利要求1所述的工程菌，其不能或者几乎不能生产聚3-羟基丁酸(phb)，例如在以葡萄糖为碳源的矿物培养基中。
3.根据权利要求1或2所述的工程菌，其中所述工程菌选自嗜盐菌，优选选自盐单胞菌属(halomonas)、假单胞菌属(pseudomonas)、大肠杆菌属(escherishia)、罗氏真养杆菌(ralstonia eutropha)、气生单胞菌属(aeromonas)、芽孢杆菌属(bacilllus)、巨大产碱杆菌(alcaligenes latus)、富养产碱菌(alcaligenes eutropus)或它们的组合，更优选为盐单胞菌(halomonas)，还更优选为halomonas bluephagenesis、halomonasaydingkolgenesis、halomonas campaniensis或halomonaslutescens，最优选为halomonasbluephagenesis td01(菌种保藏编号cgmcc no.4353)、halomonas bluephagenesistd141、halomonas bluephagenesis td1.0、halomonas aydingkolgenesis m1(菌种保藏编号cgmcc no.19880)或halomonas campaniensis ls21(菌种保藏编号cgmcc no.6593)。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的工程菌，其中所述聚羟基脂肪酸聚合酶选自phacun、phacre、phac4ak4、phac61-3、phac1437、phacac和phacar，和/或所述5-羟基丁酸单体的辅酶a连接酶选自4-羟基丁酰辅酶a转移酶(abft)、orfz、pct540和alkk，优选所述聚羟基脂肪酸聚合酶为phacun并且所述5-羟基丁...
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